灭菌工艺的开发和验证 - 制造加工工艺.docxVIP

CFU，对产品给予80～100 CFU，对产品给予80～100℃下10～15分钟热休克，可以 于10-6，NF＝10-6，利用上面这些数值，可以计算出为达 和耐热能力。一旦微生物负载的数量和耐热能力得以明确，就可以设 少被冷凝水弄湿；控制灭菌器中物品的数量，如果装载物的大小能够 1， 两种灭菌方法 蒸汽-湿热灭菌工艺开发和应用，可采用两种方法：过度杀灭法（ the overkill method ）和生物负载法（ the bioburden method ）。生物负载法也可 称为存活概率法。 1.1 过度杀灭法 工业上蒸汽灭菌周期的设定和应用，一般使用过度杀灭法（ the overkill method ）。使用过度杀灭法的目标是确保达到一定程度的无菌保证， 而不管装载 物的实际负载生物的数量多少和抗热性如何。假定生物负载的数量和耐热值设为 如下水平： N0＝106 D121＝1 分钟 Z＝10℃ 为了达到无菌保证水平 SAL小于 10-6，NF＝ 10-6 ，利用上面这些数值，可以 计算出为达到致死率所需的 FPHY和 FBIO如下： F0＝D121×（LogN0－Log NF ）＝ 12 分钟 很少发现自然生成的微生物拥有超过 0.5 分钟的 D121值。过度杀灭法假设 的生物负载数量和抵抗力都要高于实际。 大多数微生物的耐热性都要比这低， 因 此能够提供很高程度的无菌保证。 即便采用蒸汽-湿热灭菌工艺为过度杀灭法（ the overkill method ），仍然 需要对被灭菌产品的初始菌进行周期监测，并定期采用生物指示剂测试。 1.2 生物负载法 通常来说不耐热产品或物品的灭菌就不能使用过度杀灭法了。这就需要我们 所建立的灭菌周期必须能恰当地杀灭微生物负载， 但是不能导致不可接受的产品 分解。这样的灭菌周期的建立就有赖于研究产品上的微生物数量和耐热能力。 一 旦微生物负载的数量和耐热能力得以明确， 就可以设计出一个能达到 SAL小于 10-6 的灭菌周期。 按 CGMP规范生产的产品实际生物负载数量应该是很低的，每个包装约在 1～ 100CFU，对产品给予 80～ 100℃下 10～ 15 分钟热休克，可以杀灭耐热值低的微 生物。 例如： 产品的生物负载测试中，测得： N0＝102 D121＝1 分钟 Z＝10℃ 则达到无菌保证水平 SAL小于 10-6，NF＝ 10-6，利用上面这些数值，可以 计算出为达到致死率所需的 FPHY和 FBIO如下： F0＝D121×（LogN0－Log NF ）＝8 分钟 生物负载法需有实测产品活菌计数和耐热性筛选程序。必须取得足够的有关 生物负载数据，亦建立历史资料。对生物负载筛选次数的要求，取决于历史资料 ；密度和D值；是否采用生物负载法？是否测试被灭菌产品的初始菌、热分布、热穿透等项目研究的IQ、OQ、PQ方案及报告对验证于注射剂生产的辅助物料的灭菌工艺用于注射剂生产的部分辅助物料价；1.2 ；密度和D值；是否采用生物负载法？是否测试被灭菌产品的初始菌 、热分布、热穿透等项目研究的IQ、OQ、PQ方案及报告对验证 于注射剂生产的辅助物料的灭菌工艺用于注射剂生产的部分辅助物料 价；1.2灭菌设备的容积、真空度、压力以及泄漏率；1.3用什 对生物负载耐热性的测定， 可将含生物负载产品样本在推荐灭菌工艺下作分 级递增暴露时间处理， 然后进行无菌检查试验， 以测定在不同的暴露时间内存活 的菌量， 或存在的阳性样本比例。 作为一种替代方法， 生物负载微生物的耐热性 可通过分离和繁殖， 随后接种在产品上或适当载体上进行测定。 不过， 要注意繁 殖会改变生物负载的抗性。此外，还应对常规生物负载的微生物耐热性进行测定。 就生物负载而论，具有湿热高度耐热性的微生物菌株有：生胞梭菌 （Clostridium sporogenes ），凝结芽孢杆菌（ Becillus coagulans ）， 枯草芽 孢杆菌和嗜热芽孢杆菌等。 以生物负载法为依据的灭菌工艺， 需经常进行微生物筛选，以测定与产品有 关的生物负载数量和种类。 在常规生产中，应从每一种生产设备中抽取具有代表 性的产品样本， 并设计生物负载监测程序，对产品部件及生产中，包括环境和生 产过程中，任何可明显地影响生物负载地变化进行评定。 2， 用于注射剂生产的辅助物料的灭菌工艺 用于注射剂生产的部分辅助物料在生产过程中与药品直接接触，因此同样需 要灭菌。 它们包括：过滤器、胶塞、胶管、服装、不锈钢器皿、填充机械部件、 清洁用品等等。 一般通过与饱和蒸汽直接接触而实现灭活， 湿热蒸汽的能量通过 传导或对流作用传递热量。常用方法是建立能够提供相同的最小灭菌保证水平的 标准周期，再加上一定的安全系数，不管