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绿茶提取物EGCG对人肝癌细胞株体内外增殖和凋亡的影响的开题报告

概述：

肝癌是全球癌症发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。绿茶提取物中的茶多酚具有多种生物学活性，其中包括咖啡因、茶黄素和儿茶素等。其中，以(-)-环状表儿茶素-3-加州婆娑英（EGCG）为代表的儿茶素类化合物作为茶多酚的主要成分之一，具有多种生物学活性，如抗氧化、抗炎、降低血脂、抗肿瘤、抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡等作用。而且EGCG对许多肿瘤细胞株有极强的抗增殖活性，并具有很强的诱导细胞凋亡的能力。因此，绿茶中的EGCG可能对肝癌治疗具有很强的潜力。

研究目的：

本项目旨在探讨绿茶提取物EGCG对人肝癌细胞株体内外增殖和凋亡的影响，为EGCG的开发和肝癌治疗提供新思路和新方法。具体研究内容包括：

1.测定不同浓度的EGCG对人肝癌细胞株增殖和凋亡的影响。

2.研究EGCG对肝癌细胞株凋亡的相关机制，如Caspase-3、Bcl-2、Bax等。

3.探究EGCG在活体外的肝癌细胞治疗中的抑制作用。

研究方法：

1.细胞培养：使用肝癌细胞株（SMMC-7721）进行体外实验。将细胞四分之一的移植于各组的96孔板中，总细胞量为1x105个/well。

2.细胞处理：将EGCG加入培养基中，使SMMC-7721细胞处于不同的EGCG浓度下，如0、10、20、40、80、160、320μmol/L。

3.MTT实验：使用MTT试剂检测EGCG对SMMC-7721细胞的生长和细胞增殖。并将各组的数据作出增殖曲线和减少的百分比。

4.流式细胞术：可以测定细胞凋亡率，同时检测相关细胞凋亡标记物如Caspase-3、Bcl-2和Bax等。

5.裸鼠转移实验：将准备好的肝癌细胞株移植至裸鼠体内，然后注射不同EGCG浓度的绿茶提取物，观察其对肝癌细胞的抑制作用。

预期成果：

1.研究EGCG对人肝癌细胞株增殖和凋亡的影响。

2.研究EGCG对肝癌细胞株凋亡的相关机制。

3.对EGCG活体外的肝癌细胞功效进行探究。

4.在动物模型中探究EGCG对肝癌的抑制作用。

结论：

EGCG具有显著的抑制人肝癌细胞的增殖和诱导凋亡的能力，可能成为肝癌治疗的潜在药物分子。其作用机制可能与Caspase-3、Bcl-2、Bax等相关。此外，EGCG在活体外的肝癌细胞治疗也具有很强的抑制作用，具有很好的应用前景。