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RNAi对HBV拉米夫定耐药株基因表达影响的实验研究的开题报告

题目：RNAi对HBV拉米夫定耐药株基因表达影响的实验研究

一、研究背景和目的

乙型肝炎病毒（HBV）是造成人类乙型肝炎的主要病原体，严重危害人类健康。拉米夫定是目前治疗乙型肝炎的一线药物之一，但由于病毒基因突变而导致耐药性的出现，临床治疗效果受到了限制。因此，探究拉米夫定耐药株HBV的耐药机制，寻找有效的干预手段，具有重要的临床意义。

RNA干扰技术是目前应用较广的基因敲除方法之一，通过应用RNA干扰技术对HTVRNA特异性地降解对HIV、HPV和HBV等病毒基因的表达进行抑制和调控。本研究旨在探究RNAi对HBV拉米夫定耐药株基因表达的影响，分析RNAi技术作为干预HBV基因表达的新途径的可行性。

二、研究内容和方法

（一）主要研究内容

1.分离拉米夫定耐药株HBV基因；

2.建立RNAi的靶点基因库；

3.利用RNAi技术对拉米夫定耐药株HBV进行基因敲除实验；

4.研究RNAi敲除后，HBV拉米夫定耐药株基因表达的变化情况。

（二）研究方法

1.使用PCR技术从患者样本中扩增HBV基因;

2.构建RNAi诱导质粒并验证RNAi诱导效率；

3.应用RNAi技术对拉米夫定耐药株HBV进行基因敲除实验，并测定敲除后基因表达的变化情况；

4.应用实时荧光定量PCR技术分析RNAi敲除对HBV基因表达的影响。

三、预期结果

1.建立RNAi技术的靶点基因库；

2.验证RNAi技术在HBV基因敲除中的有效性；

3.分析RNAi敲除对拉米夫定耐药株HBV基因表达的影响；

4.探究RNAi技术作为干预HBV耐药性转化的新途径。

四、研究意义

本研究通过RNAi技术对HBV基因进行敲除，探究RNAi技术对HBV拉米夫定耐药株基因表达的影响，为研究乙型肝炎的耐药性提供新的解决方案和借鉴，促进相关疾病的临床治疗进步。