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不同浓度葡萄糖与葡萄糖波动对大鼠肾系膜细胞损伤及RAGE表达的影响的开题报告

一、研究背景

肾系膜细胞是肾小球外层的一种重要细胞，细胞功能异常或损伤容易导致肾小球病变。糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其主要病理改变就是微血管并发症和肾小球病变。在糖尿病患者中，高血糖会导致肾小球滤过膜的损伤，使肾系膜细胞受到不同程度的损伤，导致多种信号分子的异常表达，进而引发肾小球病变。近年来，糖尿病相关研究表明，RAGE（高级糖基化终末产物受体）的发挥对糖尿病相关的病变具有重要调节作用。

二、研究目的

该研究旨在探究不同浓度葡萄糖及其波动对大鼠肾系膜细胞的损伤及RAGE表达的影响，以期从分子水平阐明不同糖代谢状态下RAGE在肾系膜细胞的表达及作用机制，为糖尿病肾脏并发症的预防和治疗提供新的研究思路和方法。

三、研究内容

1.建立肾系膜细胞培养模型

收集新鲜大鼠肾组织，通过胶原酶溶解的方法获得肾系膜细胞，进行细胞培养，并通过免疫荧光染色法鉴定细胞的纯度和鉴定。

2.不同浓度葡萄糖处理肾系膜细胞

将肾系膜细胞分为对照组和实验组，对照组用5.5mmol/L葡萄糖液处理。实验组分别处理11mmol/L、22mmol/L、30mmol/L浓度葡萄糖液，不同浓度葡萄糖液处理时间为24h。

3.葡萄糖波动处理

在11mmol/L葡萄糖液培养基中转移肾系膜细胞，处理3d，进行24h的葡萄糖负荷（30mmol/L），然后恢复到11mmol/L培养基中，处理24h。

4.细胞活力测定

采用MTT法检测不同浓度葡萄糖处理后肾系膜细胞的活力变化。

5.RAGE蛋白和mRNA表达的检测

Westernblot和RT-PCR法检测不同浓度葡萄糖及葡萄糖波动处理后肾系膜细胞中RAGE表达水平的变化。

四、研究意义

通过本研究，可以探明不同浓度葡萄糖及葡萄糖波动对大鼠肾系膜细胞造成的损伤程度及其对RAGE表达的影响，从而深入了解不同糖代谢状态下RAGE表达及其调节作用机制，为深入阐明糖尿病相关的病变机制提供参考，并为糖尿病肾脏并发症的预防和治疗提供新的研究思路和方法。