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肠杆菌科的鉴定

1、 标本要求：

1.1尽量用药前采集标本。

1.2痰液：病人清晨咳痰于无菌、防漏小塑料盒内，切勿唾液送检。

1.3尿液：病人留取12h尿液，送检。

1.4粪便：病人留取粪便510g，送检。

1.5脑脊液及其它无菌体液：用无菌瓶直接送检。血标本不要冷冻。

1.6不可接受的标本：干的拭子、蜡盒、未消毒容器、留取24h后的尿或痰、破裂的瓶子、标本泄漏、标本无标签。

2、 仪器

35°C孵箱、普通光学显微镜

3、 试剂

羊血平皿、麦康凯平皿、硝酸盐培养管、葡萄糖蛋白胨水、葡萄糖酸盐培养管、苯丙氨酸脱氨培养管、氨基酸脱羧培养管、拘橼酸盐培养管、尿素培养管、糖醇发酵管、湖南长沙天地人肠杆菌鉴定板。

4、 试验方法及原理：

4.1硝酸盐还原试验：

方法：将待检菌接种硝酸盐培养基中，孵育过夜，加入等量A、B液1?3滴，观察结果。

结果：红色为“+”，即还原硝酸盐。

注意点：

.培养基不应含亚硝酸盐，以避免假阳性。

.某些肠杆菌还原硝酸盐的能力很强，还原硝酸盐为亚硝酸盐后，进一步将亚硝酸盐分解为氨、氮、氧化氮，造成假阴性。所以，观察结果时，如无红色出现，应加少量锌粉，仍无色，说明亚硝酸盐进一步分解，硝酸盐反应为阳性。若加锌粉后出现红色，说明锌使硝酸盐还原为亚硝酸盐，而待检菌无还原硝酸盐的能力，即硝酸盐还原试验阴性。

4.2甲基红试验

方法：将待检菌接种于葡萄糖蛋白