植物组织培养实习报告.docVIP

(完整word版)植物组织培养实习报告

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种苗学

(实习报告）

学院班级：集贤学院创新实验123班

学号：201201060214

姓名：马晶晶

指导老师：杨海芸

2015年1月14日

种苗学实习报告

摘要:此次种苗学实习的主要内容有：了解实验室的规章制度和管理办法以及设备设施、MS培养基的配置以及麻竹芽无性繁殖初代体系建立的具体操作步骤、容器苗移植的具体过程。要求掌握组织培养的操作要求，了解快速繁殖体系建立的指导思想。通过本次实习，同学们接触到很多在课堂上学不到的东西，对植物组织培养的生产发展及经营措施有了切实的认识。

?关键词：组织培养，移植，经营

1前言

植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞，原生质体等,通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

植物组织培养的特点是：

1、培养条件可以人为控制

组培采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。

2、生长周期短，繁殖率高

组培是由于人为控制培养条件,根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快。另外，植株也比较小，往往20—30天为一个周期。所以，虽然组培需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。

3、管理方便，利于工厂化生产和自动化控制

植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件，极利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利于自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向.它与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫等一系列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。

2实习目的与意义

掌握基本培养基的配置及灭菌处理。?2、掌握离体组织的采集及注意方法?.3、掌握组织培养和容器苗移植的操作技术。4、掌握无性繁殖材料管理的注意事项?。

3实验过程与内容

3。1MS培养基的配置

3.1.1母液的配置

?MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时,取其总量的1/20(50?mL）或1/200（5?mL),加水稀释，制成培养液.现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用.??

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。?

本次实习为节约时间和试机，采用实验室已配好储存的母液进行实验.

3。1。2配制培养液

用量筒从各种母液中分别取出所需的用量:各种母液分别30mL，与各种母液一起放入烧杯中。?边加母液边用磁力搅拌器搅拌，使各种母液混合均匀。

配制培养液时应注意:①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液,重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种，划掉1种，以免出错.

3.1.3调pH?

将锥形瓶置于磁力搅拌机上，边搅拌边用pH计测量?溶液的pH值。若pH偏低则用滴管逐滴加入KOH溶液，最终使溶液pH为5。7，并定容到3000mL.

3。1。3溶化琼脂及高压灭菌

用天平分别称取琼脂27g加入锥形瓶中,并将锥形瓶放入高压蒸汽灭菌锅灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕，盖上锅盖.在120?℃下，灭菌20?min。?灭菌后取出锥形瓶。

3。1。4培养基的分装?及灭菌

溶化的培养基应该趁热分装。分装时，将锥形瓶置于磁力搅拌机上边搅拌边分装。先将要用的玻璃试管准备好，设置好分装仪进