抗H-Y抗原抗体的制备和成熟精子中Y染色体编码基因mRNA的研究的开题报告.docxVIP

抗H-Y抗原抗体的制备和成熟精子中Y染色体编码基因mRNA的研究的开题报告

一、研究背景

在哺乳动物体内，雌雄性别的决定由细胞核内封闭的染色体决定。雄性携带XY染色体，而雌性携带XX染色体。对于雌雄性别的决定，在动物发生学上有很多解释和探究，其中关于H-Y抗原甚至成为了男性分化和雌雄差异研究领域的热点科研议题之一。

本研究的目的旨在，制备抗H-Y抗原抗体，以期在生物学的角度研究男性分化及其动物体内H-Y抗原的生物学作用。同时，本研究还拟研究成熟精子中Y染色体编码基因的mRNA表达状况及其可能的生物学意义。

二、研究方法

1.抗H-Y抗原抗体的制备

采用异种姜鸭胚为实验动物，将异源性的女性胎盘组织接种于异源性的男性姜鸭胚上。胚胎的着床和发育过程中产生的杂种细胞具有异源性别，其不仅可产生母源性红细胞，也可产生异源性父源性单项抗体。从中获得H-Y抗原抗体的制备原料，接着为从制备原料中分离出的TB阳性克隆细胞进行腹水、细胞培养、聚苯乙酸凝胶电泳、钠硝酸盐浓缩、醋酸钠柱等步骤，提纯并鉴定出抗H-Y抗原抗体。

2.成熟精子中Y染色体编码基因mRNA的研究

选用小鼠为实验动物，通过禁食48h，然后吸气一层氧气，气体注射器放入阴囊中给予强迫呼吸，最后经睾丸摇晃和冻存后，得到成熟的精子。从小鼠睾丸中提取RNA，采用实时荧光定量PCR技术测定Y染色体编码基因mRNA的表达水平，并进一步分析其中可能