无菌检查验证方案.docxVIP

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***无菌检查验证方案

版本 01

2011年06月01日 替代文件

QAQC

起草人 职务

审核人 职务

批准人 职务

签发 签发日期

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签发 签发日期

目 录

验证目的及要求

验证小组成员及职责

验证所必须的文件

验证方案具体实施

验证总结

验证目的及要求：

目的：

验证在进行无菌检查之前，需验证在实际检验条件下检验用物品及操作程序不得对可能存在的微生物的生长造成不良影响，旨在为进一步完善药品的质量标准，为该药品的无菌检查法的方法学进行验证而提供建议，本实验是关于对***注射液无菌检查方法的验证，结果应显示，***注射液的无菌检查方法符合验证要求。

要求：

严格按照 05 版中国药典的无菌检验方法准备验证试验用的样品和材料并依照

药典要求的操作步骤对样品进行过滤、淋洗和培养。连续3批产品的验证试验结果均应表明，所有的试验菌株在样品实验组，蛋白胨对照组和阳性对照组中最初出现生长的时间均很相近，并且在14d内都明显见微生物生长，与阳性对照比较，如样品管的微生物生长良好，则供试品的该检验量在该检验条件下已经去除抑菌作用，如样品管的微生物生长微弱，缓慢或不生长，则供试品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用，需消除。可采取以下措施：1）增加冲洗量，但每片滤膜不能超过1000ml。否则，需验证加大冲洗量对滤膜质量有无影响；2）更换滤膜品种，选择对样品吸附性较低的滤膜，并再以相应的方法重复以验证试验，确认采用无菌检查法的可行性。

验证小组成员及职责：

序号姓名

序号

姓名

职务

验证职责

1

3

验证所必须的文件：

序号文件名称

序号

文件名称

文件编号

检查情况

1

****注射剂的质量标准

有□ 无□

检查人：

日期：

复核人：

日期：

培养菌种名称

培养

菌种名称

培养基

菌株编号

温度/℃

条件

金黄色葡萄球菌

硫乙醇酸盐流体培养基(FTM)

CMCC(B)26003

32.5±2.5

有氧,5天

Staphylococcusaureus

大肠埃希菌

硫乙醇酸盐流体培养基(FTM)

CMCC(B)44102

32.5±2.5

有氧,5天

Escherichiacoli

生孢梭菌

硫乙醇酸盐流体培养基(FTM)

CMCC(B)64941

32.5±2.5

厌氧,5天

Clostridiumsporogenes

枯草芽孢杆菌

硫乙醇酸盐流体培养基(FTM)

CMCC(B)63501

32.5±2.5

有氧,5天

Bacillussubtilis

白色念珠菌

改良马丁培养基(MAM)

CMCC(F)98001

25.5±2.5

有氧,5天

Candidaalbicans

黑曲霉菌

改良马丁培养基(MAM)

CMCC(F)98003

25.5±2.5

有氧,5天

Aspergillusniger

验证产品名称****注射液

验证数量：全封闭无菌检测系统：60支/批×3批

冲洗液：0.1%蛋白胨水溶液

试验用菌株及培养基：

菌液的制备：

取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物分别接种至营养肉汤培养基中，白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，培养18～24小时；用0.9％无菌氯化钠溶液稀释至10-4～10-7制成30～100cfu/ml 的菌液。

取黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，培养5～7天，加3～5ml0.9％无菌氯化钠溶液洗脱孢子，吸取出孢子悬液（用管口带有薄的无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细管）至无菌试管内，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数为30～100cfu/ml的孢子悬液。

培养基的灵敏度和无菌检查：

取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种的大肠埃希菌菌液1ml（30～100cfu/ml），金黄色葡萄球菌菌液1ml（30～100cfu/ml）、铜绿假单胞菌菌液1ml（10～100cfu/ml）、生孢梭菌液1ml（30～100cfu/ml）各2支，另1支

不接种作为空白对照，培养3天。取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支，分别接种白色念珠菌菌液1ml（30～100cfu/ml），黑曲霉菌1ml（30～100cfu/ml）各2支，另1支不接种作空白对照，培养5天。

以每株菌接种后的培养基，应该不少于2管呈现生长，对照管澄清即无菌生长，