肝郁证模型大鼠海马差异基因表达谱的研究的开题报告.docxVIP

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肝郁证模型大鼠海马差异基因表达谱的研究的开题报告

一、论文题目

肝郁证模型大鼠海马差异基因表达谱的研究

二、研究背景及意义

肝郁证是指肝气郁结,导致人体心神失调、情绪不稳、失眠等症状的一种中医证候。在现代医学研究中,发现肝郁证与神经系统疾病(如焦虑、抑郁、失眠等)、消化系统疾病(如胃痛、消化不良、便秘等)等有着密切的关联。

海马是大脑较为关键的部位之一,承担着记忆与学习等重要功能。研究表明,人体情绪、压力等因素可以影响海马神经细胞的活动及神经元生成。因此,本研究将以肝郁证模型大鼠为对象,通过测定海马基因表达谱的变化情况,探究肝郁证障碍下海马神经元的影响机制,寻找肝郁证治疗新靶点及医学干预手段。

三、研究方案

(一)实验材料

1.SD大鼠20只,雄性活体,自然点间隔,6周龄,体重180g±20g

2.肝郁证建模液(蜜丸剂),中药材茯苓12g、郁金6g、香附6g、川芎6g、川楝子6g、山楂10g,水浸30min,煎煮取汁,浓缩干燥制成粉末,与辅料(淀粉、羊乳糖、山梨酸钾等)按一定比例混合

3.生理盐水

(二)实验方法

1.实验组与空白组:每组10只大鼠,实验组灌胃给予肝郁证建模液,剂量为每100g体重2g,1次/天,持续21天;空白组灌胃给予相同用量的生理盐水。

2.破坏神经元实验:在实验过程的第18天,向实验组大鼠腹腔注射左旋多巴(L-DOPA),剂量为每100g体重25mg,导致脑内儿茶酚胺水平过高,选择性破坏海马神经元。

3.实验结束后,取大鼠海马组织进行RNA提取、纯化及cDNA合成。基因芯片技术分析、筛选并鉴定差异表达基因。

4.对研究所得基因进行功能分类、通路分析以及相关性分析。

(三)实验评价

用基因芯片技术分析实验组与空白组海马组织中差异基因表达情况,对所得基因进行功能性分类和生物信息学分析,通过不同通路分析、网络分析及前基因分析,建立肝郁证模型大鼠海马差异基因表达谱。

四、研究预期成果

通过对肝郁证模型大鼠海马组织差异基因的筛选鉴定及通路分析,得到了与肝郁证相关的基因表达谱,并找到了一些与其紧密关联的医学干预靶点,这将为肝郁证的中西医结合治疗提供新的理论基础和治疗新靶点。

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