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Biacore™8K基础培训
Chapter1
表面等离子共振(SPR)技术与Biacore原理
课程目标
TM
•Biacore技术原理
‒表面等离子共振(SurfacePlasmonResonance,SPR)
‒传感图Sensorgram
TM
‒Biacore提供的分子相互作用信息
TM
•Biacore设备核心组件
‒SPR检测器
‒微流控系统(IFC)
‒传感芯片SensorChip
TM
•Biacore分析基本流程
‒偶联Immobilization
‒进样SampleInjectionBiacoreTM8k
‒再生Regeneration
•Biacore在基础科研中的应用
Cytiva3
BIAcore技术原理
BiomoleculeInteractionAnalysiscoretechnique
Cytiva4
Biacore
Ka:结合速率常数
•基于表面等离子共振原理(SPR)Kd:解离速率常数
KD(亲和力)=Kd/Ka
•高分辨率、高灵敏度、高质量数据
•无需添加任何标签
•实时检测(Real-time)
•全面的互作信息
Cytiva5
表面等离子共振原理(SPR)
反射光能量检测器
入射光源能量
角度
SPR角度
棱镜
50nm金膜时间
样品
微流路液相系统
•全内反射的条件下,入射光造成薄金层等离子体发生共振,导致反射光在某一特定角度(SPR角)能量低至几乎为
零;
•SPR角对金膜溶液测100-200nm范围内的折光率变化非常灵敏;
•分子间可逆的结合/解离造成金膜附近折光率的实时变化,这一现象被Biacore实时记录。
•Biacore类似一个高精度的光学天平,通过SPR原理放大信号,能检测芯片表面1pg/mm2的物质变化。
Cytiva
Biacore提供的生物分子相互作用信息
结合解离传感图
•有无结合(YesorNo)
•结合的特异性和选择性(Specificity)
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