大豆β-伴大豆球蛋白基因RNAi表达调控机理研究.docVIP

大豆β-伴大豆球蛋白基因RNAi表达调控机理研究

β-伴大豆球蛋白是大豆蛋白中的主要抗原蛋白,它能引起人和畜禽产生过敏反应,限制了大豆及其产品的广泛应用。因而,有必要降低和消除大豆中β-伴大豆球蛋白的含量,提高其营养价值。

目前常用的消除方法有物理方法、化学方法、生物方法等,但这些消除方法效果都不够理想。利用育种方法选育致敏蛋白缺失型大豆是解决大豆抗原蛋白致敏性的最有效方法。

传统育种方法受育种周期、种质资源等条件的限制,育成的β-伴大豆球蛋白缺失材料十分有限。近年来迅猛发展起来的RNAi技术为大豆的品质性状改良提供了一条新途径。

目前利用RNAi技术对单一基因表达调控的研究较多并已取得成功,但对多基因干扰后表达调控效果的研究尚无报道。β-伴大豆球蛋白主要由α′亚基、α亚基、β亚基三个亚基组成。

因此根据RNAi的原理,抑制各亚基基因mRNA的表达量,就能够有效降低β-伴大豆球蛋白在大豆中的含量,从根本上消除其过敏性,进而提高其营养价值。本研究利用RNAi技术分别调控β-伴大豆球蛋白的α′亚基基因、α亚基基因、β亚基基因及α′亚基和β亚基双价基因的表达,利用PCR、实时荧光定量PCR、β-伴大豆球蛋白酶联免疫技术,结合品质分析技术和农艺性状的鉴定,研究和评价RNAi技术对β-伴大豆球蛋白的三个主要亚基基因的表达调控机理和效率,探讨对多个目标基因协同表达调控的新途径,并创制大豆新种质