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黑曲霉产植酸酶发酵工艺优化

李海燕;王志;陈雄;付刚

【摘要】TheoptimizationoffermentationprocessfortheproductionofacidicphytasebyAspergillusnigerwascarriedout.Fermentationmediumwasoptimizedthroughorthogonalarraydesignandtheoptimalmediumconsistedof5%solublestarch,5%beanpulp,0.9%KCl,0.1%FeSO4?7H2O,0.9%MgSO4?7H2O,0.5%MnSO4.Theeffectofthefactorontheyieldofphytasedecreasedinthefollowingorder:MgSO4-7H2O,solublestarch,beanpulp,MnSO4,FeSO4-7H2O,KCl.Baseonthesinglefactorexperiment,theoptimalfermentationconditionwasfermentationtemperature30°C,theinitialpH5.5,theshakingspeed220r/minandthefermentationtime60h.Intheoptimizedconditions,theacidicphytaseenzymeactivityreached20U.%对黑曲霉液态发酵产酸性植酸酶的发酵工艺进行了优化实验。通过正交试验进行培养基优化得到最佳配比为：5%可溶性淀粉，5%豆粕，0.9%KCl,0.1%FeSO4?7H2O,0.9%MgSO4?7H2O,0.5%MnSO4。根据极差可知，影响程度，MgSO4?7H2O可溶性淀粉〉豆粕〉MnSO4FeSO4-7H2OKCl。通过对发酵条件进行单因素优化得到黑曲霉发酵产植酸酶的最佳发酵条件是：发酵温度30C,初始pH5.5，摇床转速220r/min，发酵时间60h。在优化条件下，酸性植酸酶酶活力达到了20U。

【期刊名称】《食品研究与开发》

【年(卷)，期】2014(000)011【总页数】4页(P105-108)

【关键词】黑曲霉;液态发酵;培养基;工艺优化【作者】李海燕;王志;陈雄;付刚

【作者单位】湖北工业大学生物工程学院，湖北武汉430068;湖北工业大学生物工程学院，湖北武汉430068;发酵工程教育部重点实验室，湖北武汉430068;湖北工业大学生物工程学院，湖北武汉430068;发酵工程教育部重点实验室，湖北武汉430068;潍坊盛泰药业有限公司，山东昌乐262400

【正文语种】中文

植酸酶（Phytase）是一类水解植酸的磷酸酶类，在动物、植物、微生物中均有发现，其主要来源是微生物源植酸酶。自然界有许多微生物都能产生植酸酶，如细菌、酵母和丝状真菌等，特别是曲霉菌属微生物，如黑曲霉、无花果曲霉、米曲霉等都能产生活性较高的植酸酶［1］。微生物来源的植酸酶与其他来源的相比较具有来源广、生产周期短、pH耐受范围大等优点，因而优化培养条件和工艺、进一步提高产量，成为微生物发酵产植酸酶研究的热点。

目前植酸酶在饲料中应用比较广泛，植酸酶可以降解植酸盐蛋白质络合物，提高动物对蛋白质的利用，从而减少植酸盐对微量元素的螯合，提高饲料的营养价值，另一方面可以降低粪便中的磷含量，减少环境污染［2-6］。

本文以黑曲霉为底物，利用液态发酵，探索了不同工艺条件对黑曲霉发酵产植酸酶的影响，筛选了最佳工艺条件，为大规模发酵生产廉价的植酸酶制剂奠定基础。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1菌种

黑曲霉（Aspergillusniger）:湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室保藏。

1.1.2培养基

活化培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，去离子水1000mL。种子培养基：麸皮2g，葡萄糖3g，硫酸铵0.15g，去离子水100mL。

摇瓶培养基：蛋白腺1.0g，葡萄糖60.0g,NH4NO32.0g,MgSO4-7H2O0.5g,KCl0.5g,FeSO4?7H2O0.01g,MnSO40.01g，吐温-802.0mL,溶于1000mL去离子水中。

优化培养基：详见实验方法。

1.2实验方法1.2.1培养方法

1.2.1.1活化培养

将黑曲霉