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黑果枸杞中花色苷的提取与结构鉴定

谭亮;董琦;曹静亚;耿丹丹;胡风祖

【摘要】采用紫外-可见光谱法并结合高效液相色谱-电喷雾串联质谱对黑果枸杞中花色苷的组成及结构进行了鉴定.结果显示:（1）黑果枸杞花色苷在0.1%盐酸-甲醇溶液中呈紫红色表明花色苷中的主要成分可能是飞燕草色素、牵牛花色素、锦葵色素及其衍生物中的一种或几种;向提取溶液中加入5%AlCl3甲醇溶液后无红移现象表明花色苷结构B环上无邻位酚羟基;A440mm/AAmx比值小于20%表明该色素是3,5位均带有糖苷键的双取代花色苷;在304nm处有一最大吸收峰表明该色素分子内含有酰基;色素水解后主要生成葡萄糖.由上述可初步推测出黑果枸杞色素中主要为酰基化的锦葵色素-3,5-二葡萄糖苷;（2）经紫外分光光度法、质谱和文献报道综合分析鉴定出黑果枸杞中含有8种花色苷，分别是:飞燕草素-3-0-葡萄糖苷、芍药素-3-0-葡萄糖苷、矮牵牛素-5-0-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-0-（6-0-对香豆酰）芸香糖苷-5-0-葡萄糖苷、锦葵色素-3-O-（6-0-对香豆酰-3-0-乙酰）-5-0-二葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-（6-O-乙酰）葡萄糖苷、锦葵色素-3-0-（6-0-对香豆酰）葡萄糖苷和锦葵色素-3,5-二葡萄糖苷，其含量依次为0.86%、1.17%、2.38%、11.79%、68.35%、0.63%、5.24%、9.58%.花色苷是黑果枸杞中重要的组成成分,该试验可为黑果枸杞的质量控制提供依据.

【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年（卷），期】2014（026）011【总页数】7页(P1797-1802,1760)

【关键词】黑果枸杞;花色苷;紫外-可见光谱法;高效液相色谱-电喷雾串联质谱;结构鉴定【作者】谭亮;董琦;曹静亚;耿丹丹;胡风祖

【作者单位】中国科学院西北高原生物研究所，西宁810008;中国科学院西北高原生物研究所，西宁810008;中国科学院西北高原生物研究所，西宁810008;中国科学院西北高原生物研究所，西宁810008;中国科学院西北高原生物研究所，西宁810008

【正文语种】中文

【中图分类】Q946.83;R284.1

黑果枸杞(LyciumruthenicumMurr.)系茄科(Solanceae)枸杞属(LyciumL.)植物［1］，是西北干旱地区一种特有的多年生灌木野生植物。其耐干旱，生长于盐碱

土荒地、沙地或路旁，可作为水土保持的灌木植物［2］。其果实味甘、性平、清心热，据《四部医典》中记载，藏医将其用于治疗心热病、心脏病、月经不调、停经等病症;民间用作滋补强壮、明目及降压药［3-5］。现代药理学研究表明黑果枸杞中的多糖具有抗疲劳、降血糖［6］等药理活性;黄酮类化合物具有抗氧化及其他营养保健作用等［7］;原花青素具有抗氧化、抑制肿瘤等功能［8］;花色苷具有抗氧化、抗突变、抑制流感病毒和疱疹病毒［9,10］等活性。其中，花色苷的药理活性及可作为天然色素的良好来源越来越备受人们的关注，测定方法已有多篇文献报道，包括有高效液相色谱法、色价法、消光系数法、pH示差法等。然而在测定时存在的问题有:花色苷易氧化，其标准品较难获得;采用色价法、消光系数法测定时仅仅测得花色苷总量，而不能测得花色苷具体的单一组成成分;采用pH示差法测定时多以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷计，而事实上由试验结果可知黑果枸杞中没有矢车菊素-3-O-葡萄糖苷，这样计算结果必然造成很大误差;有采用高效液相色谱法测定黑果枸杞中的花色苷组分含量的文献报道，然而也只是测定了其中部分成分，并不全面。本文首先采用紫外-可见光谱法，通过一系列化学试验并结合全波长扫描图分析主要花色苷的结构，然后采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析技术，无需对照品，在分离化合物的同时，在线提供每个花色苷类物质的紫外光谱信息、相对分子质量、分子结构碎片的质谱信息，结合文献资料分析花色苷的具体结构，可为黑果枸杞质量控制提供了一定参考，为其资源的研究与开发利用提供了科学理论依据。

1材料与方法

1.1材料、试剂与仪器

黑果枸杞:采自青海诺木洪农场，经中国科学院西北高原生物研究所分析测试中心胡风祖教授鉴定确认为正品。样品预处理:将收集的黑果枸杞阴干、粉碎，过40目筛，装入密封袋中密封，置干燥器中避光保存。

Delphinidin-3-O-glucoside（飞燕草素-3-O-葡萄糖苷）（H1401，上海惠诚生物科技有限公司）;Peonidin-3-O-glucosidechloride（芍药素-3-O-葡萄糖苷氯化物）（40796，Sigma）;Malvinchloride（锦葵色素-3，5-二葡萄糖苷）（72815，S