《犬巴贝斯虫实时荧光 PCR 检测方法》.pdfVIP

《犬巴贝斯虫实时荧光 PCR 检测方法》.pdf

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T/CVMAXXXXX—XXXX

犬巴贝斯虫实时荧光PCR检测方法

Real-timePCRassayfordetectionofBabesiacanis.

一程度的标识

加国际标准致性

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在提交反意见时

馈,请将您知道的相关专利连支持性

同文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

犬巴贝斯虫实时荧光PCR检测方法

1范围

本文件规定了犬巴贝斯虫实时荧光PCR检测方法的试剂、仪器和耗材、操作步骤、结果判定、实验

室生物安全等技术要求。

本文件适用于血液中犬巴贝斯虫核酸的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,

仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本

文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4试剂

4.1DNA提取试剂

照书进

N提取试剂盒并参说明

病DA

病核酸提取试剂条,或选取商品化的毒

DAN提取试剂采用现成的毒

行DA

N提取。

4.2菌PB

已灭1×S缓冲液

4.3引物探针

犬巴贝、吉式贝斯)的引物及探针:

4.3.1采用针对巴贝斯虫(斯巴

-

ACCAAACGACAGA3

引F:5-TGTCCC

上游物BG-

AG-

CTCCCCAATGTCAG3

下游引物BG-R:5-TTT

GTCACTGGC-3

5GTGAGTGACG

荧光探针BG-P:-

上游引物BC-F:5-GTTCGAGTTTGT

CATCGTT-3

下游引物BC-R:5-ATGCCCCCAACCGTTCTATTA-3

CTTTAC-3

荧光探针BC-P:5-AGTTCGCTTTTGGGTTTCCTT

4.3.2使用国家农业行政主管部门批准的其他引物、探针,应对检测程序和判定标准作相应调整。

4.4阴性及阳性对照

性对制备方法见附录A。

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