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应用蚕豆根尖微核技术检测不同品种茶叶遗传毒性

目录

TOC\o1-9\h\z\u目录 1

正文 1

文1：应用蚕豆根尖微核技术检测不同品种茶叶遗传毒性 2

一、研究目的与意义 2

二、实验材料与方法 2

４结论 5

文2：运用蚕豆根尖微核技术评价贵州省水城河水污染状况 5

1材料与方法 8

1．1水样采集 8

1．2材料处理与恢复 8

1．3细胞学观察 8

1．4数据处理与统计 9

2结果与分析 9

2．1各采样点水的蚕豆根尖微核率 9

2．2各采样点水样的污染评价 9

3小结与讨论 10

3．1水城河水质污染的原因分析 10

3．2水城河水质的遗传毒性状况 11

3．3治理对策 11

原创性声明（模板） 12

正文

应用蚕豆根尖微核技术检测不同品种茶叶遗传毒性

文1：应用蚕豆根尖微核技术检测不同品种茶叶遗传毒性

一、研究目的与意义

近代科学研究表明，茶叶中含有丰富的营养成份以及多种对人体健康有益的物质，这些营养成分是人体正常生长发育所必须的，并可以帮组人体预防和治疗某些疾病，如茶中含有大量的维生素Ｃ可降低胆固醇值，茶叶可预防糖尿病。市场上有许多茶产品，如佳洁士茶爽牙膏、茶多酚片、绿茶洁面乳等。

茶叶是日常生活的必需品，也是我国重要的传统出口商品，但随着人们生活水平的提高，对食品安全问题越来越重视，茶叶中农药残留问题已经成为国际贸易中的技术焦点，各国都制定了茶叶中的农药残留限量标准，检测项目不断增加，要求日趋严格。我国茶叶出口屡遭农药残留超标困扰，农药残留超标问题已经成为我国茶叶出口的一道关卡。

二、实验材料与方法

２．１实验材料

实验材料：松滋青皮豆。

茶叶的品种：绿茶Ⅰ，绿茶Ⅱ，红茶，普洱生茶，普洱熟茶，这些茶叶都是２０１４年的春茶，在市场上随机购买。

２．２研究方法

基本按照《水和废水监测分析方法》进行，并做部分改进。

２．３实验步骤

２．３．１制备蚕豆根尖

（１）实验材料的培育

购松滋青皮豆种子，晒干贮藏于干燥器内或４℃冰箱内备用。

（２）实验材料的选择

将蚕豆从４℃的冰箱中取出，在室温（２０℃－２５℃）下放置４８ｈ，选择颗粒饱满、大小均匀、胚芽无损坏、没有被虫食用的蚕豆干种子。

（３）浸种催芽

将选出的蚕豆放入底部垫洁净纱布的解剖盘中，在解剖盘中加入适量的蒸馏水，淹没蚕豆的３／４即可，置于室温下培养２４ｈ，此间换水３次。种子充分吸胀萌发后，移至解剖盘中覆盖纱布以保持湿度，室温培养。待根长至１－２ｃｍ左右时，选择３２０个初生根尖生长良好、根长一致的蚕豆种子，随机分成１６组，每组２０个备用。

２．３．２处理蚕豆根尖

将上述备用蚕豆留下其中１组用蒸馏水培养作对照组，其余１５组分别用受试液培养，处理２４小时，每隔８ｈ换一次水。

２．４．３蚕豆根尖的恢复培养

将经各受试液处理过的根尖，用蒸馏水浸洗３次，每次２－３ｍｉｎ，将洗净的种子再放入底部垫有纱布培养皿中，盖上纱布在室温下保湿恢复培养２４ｈ。

２．４．４蚕豆根尖的固定与保存

将恢复培养后的蚕豆，剪下根尖１ｃｍ－１．５ｃｍ，用卡诺固定液固定２４ｈ。将固定后的蚕豆根尖用９０％酒精浸洗半小时，再用７０％的酒精浸洗半小时，然后放入７０％的酒精中置于４℃冰箱中保存，酒精的体积约为根尖的１５倍。

２．４．５解离蚕豆根尖

先用蒸馏水浸洗根尖１－２次，然后再用卡诺固定液固定一次，时间３－５分钟；将固定好的蚕豆根尖用蒸馏水浸洗２次，每次５ｍｉｎ，若根尖在冰箱中的储存时间短则不需要再次固定。用１ｍｏｌ／Ｌ盐酸于５０℃水浴箱中解离根尖５ｍｉｎ，再用蒸馏水浸洗２次，每次５ｍｉｎ。

２．４．６徒手制片

取出根尖置于擦净的载玻片上，用解剖针截取２ｃｍ左右根尖分生组织（解离后稍透明部位），用解剖针将其捣碎并均匀的涂开，滴上１－２滴卡宝品红染液，盖上盖玻片，染色５－１０ｍｉｎ后压片。

２．４．７蚕豆根尖的镜检及微核识别标准

制备好的装片置于显微镜上观察，每个待测液培养的根尖装片及对照组装片至少分别镜检１０个根尖，每个根尖装片在高倍镜下观察１０个视野，每个视野中大约１００个细胞，每个装片统计约１０００个细胞中的微核数，并做记录。

微核识别标准：（１）大小为主核的１／３－１／１５，且于主核分离；（２）着色与主核相当或稍浅；（３）形态为圆形、椭圆形、不规则形。

３实验结果

由下图可知，这五种（绿茶Ⅰ、绿茶Ⅱ、红茶、普洱熟茶、普洱生茶）茶叶洗茶汤ＭＣＮ‰都高于各自相对应的一泡茶汤的ＭＣＮ‰，而一泡茶汤又高于相对于的二泡茶汤的ＭＣＮ‰。红茶洗茶汤、一泡茶汤、二泡茶汤的微核率都高于其它品种对应的ＭＣＮ‰；绿茶Ⅰ洗茶汤、一泡茶汤、二泡茶汤的微核率都低于其它品种对应的Ｍ