HPLC法测定伤风停胶囊中欧前胡素的含量.docxVIP

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HPLC法测定伤风停胶囊中欧前胡素的含量

一、仪器与试剂

1.仪器:采用Agilent1260系列高效液相色谱仪;

2.色谱柱:ZORBAXEclipseXDB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);

3.流动相:甲醇-水(60:40,体积比);

4.试剂:欧前胡素参考标准品(国家药典委员会批准的药物标准品);

5.其他:二甲基亚砜、磷酸二氢钾、三乙胺等。

二、样品制备

将伤风停胶囊取出粉碎,取药粉约0.1g,加入10ml二甲基亚砜中,超声处理15分钟,置于室温下振荡摇匀,再以0.22μm滤膜过滤,取滤液作为测试溶液。

三、色谱条件

1.流动相A:甲醇-水(60:40,体积比),流动相B:对甲苯;

2.梯度洗脱:0-5分钟,A:B=80:20;5-10分钟,线性梯度至A:B=70:30;

3.检测波长:280nm;

4.注射量:10μl;

5.柱温:30℃;

6.流速:1.0ml/min。

四、标定方法

取适量欧前胡素参考标准品,加入二甲基亚砜稀释成含量为1mg/ml的溶液,再稀释成不同浓度的欧前胡素溶液,即0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml。按照上述色谱条件进行HPLC检测,绘制出欧前胡素的标准曲线,计算出相关系数和回归方程。

五、测定结果

对伤风停胶囊中欧前胡素含量进行测定,按照上述色谱条件进行HPLC分析,得到欧前胡素峰面积,并通过标准曲线计算出其含量为XXmg/g。

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