细胞培养操作规范.pptVIP

第1页，讲稿共27页，2023年5月2日，星期三一：细胞培养的基本条件：1.无菌环境：细胞培养间消毒a：使用前紫外照射20-30分钟b：使用完75%酒精擦拭台面，紫外照射15分钟。c：每两周用84消毒液擦拭地面、台面一次的方式进行消毒第2页，讲稿共27页，2023年5月2日，星期三超净工作台：使用前开启柜内紫外灯照射15－30分钟使用时开启鼓风，在台面内操作使用完毕后要用75%酒精将台面和台内四周擦拭干净，紫外照射10分钟。第3页，讲稿共27页，2023年5月2日，星期三CO2培养箱：1.设定的条件为37℃，5％CO2。2.使用CO2培养箱应注意的问题：?用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，以保证通气。?保持培养箱内空气干净，定期消毒擦拭。?箱内蒸馏水槽中定期更换灭菌蒸馏水3000毫升，以保持箱内湿度。第4页，讲稿共27页，2023年5月2日，星期三控制水盘内污染的方法：?1、?定期(至少每两周一次)，更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。2、?在水盘内添加适量硫酸铜，预防真菌污染。配制方法：20g无水硫酸铜＋5ml浓硫酸＋1L灭菌纯水。3、?水盘内添加适量抗生素。?4、定期为培养箱（含水盘）进行一次高温灭菌。第5页，讲稿共27页，2023年5月2日，星期三2.细胞培养条件细胞培养器皿：