清华仪器分析课件-第九章紫外吸收光谱分析Ultraviol.pptxVIP

清华仪器分析课件-第九章紫外吸收光谱分析ultraviol

目录

contents

引言

紫外吸收光谱的基本原理

实验技术与方法

结果分析与解读

实际应用与案例分析

结论与展望

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引言

掌握紫外吸收光谱的基本原理和应用。

了解紫外光谱分析在物质鉴定、化学反应监测和生物分子检测等领域的重要作用。

培养学生对紫外光谱分析实验操作和数据处理的能力。

紫外光谱分析可用于确定物质的分子结构和化学组成，通过特征吸收峰的识别，可以对未知物质进行鉴定和分类。

物质鉴定

紫外光谱分析可用于监测化学反应过程中物质的变化，通过分析反应前后紫外光谱的变化，可以了解反应机理和反应进程。

化学反应监测

紫外光谱分析可用于检测生物分子，如蛋白质、核酸等，通过分析生物分子的紫外吸收光谱，可以研究其结构和功能，为生物医学研究提供有力支持。

生物分子检测

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紫外吸收光谱的基本原理

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紫外光谱的波长范围通常在190-400nm之间，对应于分子中电子从基态到激发态的跃迁。

分子吸收特定波长的光子后，电子从基态跃迁至激发态，当电子返回基态时，以光子的形式释放能量，形成光谱。

分子吸收特定波长的光子后，电子从低能级跃迁至高能级，产生吸收光谱。

电子跃迁

分子吸收光子后，不仅电子发生跃迁，分子内部的振动和转动状态也可能发生变化。

振动-转动跃迁

具有共轭体系的分子在紫外光谱中表现出较强的吸收峰。

共轭结构

取代基的影响

溶剂效应

取代基的性质和数量对紫外光谱的吸收峰位置和强度产生影响。

溶剂的性质可以改变分子在紫外光谱中的吸收峰位置和强度。

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02

01

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实验技术与方法

用于测量物质对紫外光的吸收程度，是紫外吸收光谱分析的核心仪器。

紫外可见分光光度计

用于盛放待测样品，有石英和玻璃两种材质。

样品池

用于准确移取和量取样品。

移液管和容量瓶

用于过滤和分离样品中的杂质和颗粒。

滤纸和离心管

将待测样品溶解在适当的溶剂中，以保证其在紫外可见光范围内有较好的吸收。

样品溶解

去除样品中的杂质和颗粒，保证测试结果的准确性和稳定性。

过滤和离心

对于高浓度的样品，需要进行稀释处理，以避免过大的吸光度值。

稀释

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结果分析与解读

根据紫外光谱图的形状、波峰和波谷的位置以及峰强度等信息，对化合物的结构进行解析。

通过对比标准光谱图或已知化合物的紫外光谱，识别出特定波长下的特征吸收峰，从而确定化合物中的特定官能团或结构单元。

特征峰识别

谱图解析

直接比较法

将已知浓度的标准样品与待测样品在相同条件下进行测定，通过比较两者的吸光度值来计算待测样品的浓度。

工作曲线法

在一定浓度范围内，测定一系列已知浓度的标准样品，绘制吸光度与浓度的关系曲线，再根据待测样品的吸光度值在工作曲线上查得其浓度。

主要包括仪器误差、操作误差、样品不均匀性、环境因素等。

误差来源

定期对仪器进行校准和维护，保持实验操作的一致性，对样品进行充分混合和均匀化处理，控制实验环境的恒定等。

减小误差的方法

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实际应用与案例分析

确定有机化合物的结构

紫外吸收光谱可以用于鉴定有机化合物的结构，通过分析光谱特征和峰的位置，可以推断出有机化合物的共轭体系、双键数量等结构信息。

反应动力学研究

通过监测化学反应过程中紫外吸收光谱的变化，可以研究化学反应的动力学过程，了解反应速率常数、反应机理等重要参数。

利用紫外吸收光谱可以研究蛋白质和核酸的二级结构，如α-螺旋、β-折叠等，有助于了解生物大分子的空间构象和功能特性。

蛋白质和核酸的结构研究

通过观察生物分子与配体或药物结合前后紫外吸收光谱的变化，可以研究生物分子间的相互作用和识别机制。

生物分子的相互作用

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结论与展望

无损检测：紫外吸收光谱法是一种非破坏性分析方法，样品在测定后仍可进行其他分析。

联用技术发展

紫外吸收光谱法将与其他分析技术如色谱、质谱等联用，实现复杂样品中多组分的快速、准确分析。

新型检测技术应用

随着科技的发展，新型检测技术如表面增强拉曼散射（SERS）、等离子体增强拉曼散射（PLSERS）等将与紫外吸收光谱法结合，提高检测灵敏度和选择性。

智能化与自动化

未来紫外吸收光谱分析将向智能化、自动化方向发展，实现自动进样、自动校准、自动数据处理等全流程自动化分析。

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