第二章基因工程工具酶(简化版).pptxVIP

第二章 基因工程的工具酶;一、限制性核酸内切酶的发现

限制 (restriction)

修饰 (modification)

限制性核酸内切酶的生物学功能：自我保护功能(只切外来的DNA，自身DNA被甲基化后切不动);核酸酶：水解断裂多核苷酸链的两个相邻核苷酸的

3,5磷酸二酯键

核糖核酸酶（RNase）：

脱氧核糖核酸酶（DNase）：核酸外切酶（exonuclease）：

核酸内切酶（endonuclease）：

?限制性核酸内切酶：;二、限制性核酸内切酶的分类;平末端

粘性末端

1单位酶活性(1unit1U)：在最适反应条件下1小时完全切割1ugλDNA样品的酶量。

同序同裂酶(识别及酶切位点相同):

同序异裂酶(识别位点相同但酶切位点不同):

同尾酶(酶切位点不同但产生相同的粘性末端):;酶切位点的计算：;三、限制性核酸内切酶的命名;思考题：

流感嗜血杆菌（Haemophilusinfluenzae）d菌株

有三种限制酶，分别怎么表示？

HindI、HindII、HindIII

BaciUusamyloliquefaciensHStreptomycesalbusI;一、天然DNA的制备;2、天然DNA的提取;二、DNA的纯化;三、DNA的浓缩;四、限制性核酸内切酶反应1、限制性核酸内切酶反应缓冲液;2、单酶切法;3、双酶切法;4、部分酶切;5、DNA分子的限制性图谱;五