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包埋-脱水法常温和低温保存绿色巴夫藻的开题报告

一、研究背景及意义

绿色巴夫藻是一种单细胞绿藻，具有生长快、寿命短、养殖容易等特点，是生物能源、食品、化妆品等领域的重要原料之一。然而，由于其生长期短，运输、贮存困难，限制了其应用范围的扩大。因此，开发一种高效、简便的保存方法对绿色巴夫藻的开发利用具有重要意义。

目前，对绿色巴夫藻的保存方法主要包括液氮冷冻保存、真空冷冻干燥等方法，但这些方法保存条件苛刻、操作复杂、成本高等问题也达不到预期效果。而包埋-脱水法不仅保存条件温和，还能保持细胞形态、结构、代谢及功能等方面的完整性，因而成为绿色巴夫藻保存的可行选择。

二、研究目的

本研究旨在探究包埋-脱水法在常温和低温条件下对绿色巴夫藻的保存效果及其适用性，为推广绿色巴夫藻的应用提供有效的技术支持。

三、研究内容和方法

1.实验材料

绿色巴夫藻（Chlorellavulgaris）菌株。

2.实验设计

（1）常温条件下的绿色巴夫藻保存试验：将青、高绿斑藻接种在美国德特里希媒体（Derrickmedium）中培养至稳定期，然后分别进行不同条件包埋-脱水处理，分为三组，分别为：0℃低温，常温（25℃）、常温+氯化钙（0.1mol/L）。保存时间为1、3、6个月。保存期限结束后，对不同条件下的菌株进行生长情况、生长速率、菌株形态、色泽等指标的评估并与对照进行比较。

（2）低温条件下的绿色巴夫藻保存试验：将菌株置于4℃条件下，冷蓄电池冰箱中进行低温包埋-脱水处理，保存时间为1、3、6个月。保存期限结束后，对不同条件下的菌株进行指标评估。

3.实验方法

（1）绿色巴夫藻培养方法：在室温25℃、光照强度为3000lx下，使用德特里希培养基进行生长培养。

（2）包埋-脱水法保存：用相应的定性、定量的脱水剂，如醋酸甲酯（样本/解剖刀），逐渐将菌株置于脱水剂中，使得菌体细胞逐渐失去水份。待菌株完全脱水后，采用差示干燥法，将被包埋的脱水菌体与树脂均匀混合，然后浸泡在连续变化的油醋溶液中，直到材料完全硬化，再用切片机切片。

4.数据分析

采用SPSS23.0软件对试验数据进行统计分析，并对不同保存条件下的绿色巴夫藻指标进行比较分析。

四、预期成果

1.探究了包埋-脱水法在常温和低温条件下对绿色巴夫藻的保存效果及适用性。

2.研究结果能够为绿色巴夫藻的应用提供有效的保存技术支持。

3.可为生物能源、食品、化妆品等领域的绿色巴夫藻开发利用提供一定的科学依据和技术支持。