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表达人血清白蛋白-C肽融合蛋白毕赤酵母工程菌的构建的开题报告

摘要

本开题报告主要介绍了弗氏毒素人血清白蛋白-C肽融合蛋白的研究背景、研究意义以及毕赤酵母工程菌的构建方法和实验方案。

当前，弗氏毒素是一种非常常见的致病菌毒素，对人类健康造成了严重的威胁。因此，研制一种有效的抗体治疗弗氏菌引发的疾病具有重要的临床应用价值。而人血清白蛋白-C肽融合蛋白则是一种具有高度细胞渗透性的载体，广泛应用于药物输送和免疫治疗领域。因此，利用人血清白蛋白-C肽融合蛋白作为载体，研制针对弗氏毒素的抗体具有很大的潜力。

本研究采用毕赤酵母作为表达载体，构建人血清白蛋白-C肽融合蛋白的表达系统。实验过程中，首先通过PCR扩增得到人血清白蛋白和C肽基因的序列，然后将两者连接起来构建成融合蛋白基因。接着，将融合蛋白基因插入到毕赤酵母的表达载体中，得到重组质粒。最后，将重组质粒转化到毕赤酵母细胞内进行表达。

通过本研究，我们期望能够构建出高效表达人血清白蛋白-C肽融合蛋白的毕赤酵母工程菌，为后续的研究提供有力的支持。

关键词：毕赤酵母；人血清白蛋白-C肽融合蛋白；表达系统；重组质粒；弗氏毒素

Abstract

Thisproposalmainlyintroducestheresearchbackground,significance,andexperimentalplanoftheconstructionoftheengineeredyeaststrainofbiotinylatedhumanserumalbumin-Cpeptidefusionprotein.

Currently,botulinumtoxinisaverycommonpathogenictoxinthatposesaseriousthreattohumanhealth.Therefore,thedevelopmentofaneffectiveantibodytherapyfordiseasescausedbybotulinumbacteriahasimportantclinicalapplicationvalue.Humanserumalbumin-Cpeptidefusionproteinisahighlycell-permeablecarrierwidelyusedindrugdeliveryandimmunotherapy.Therefore,theuseofhumanserumalbumin-Cpeptidefusionproteinasacarrierhasgreatpotentialfordevelopingantibodiesagainstbotulinumtoxin.

Inthisstudy,Pichiapastoriswasusedasanexpressionvectortoconstructanexpressionsystemforhumanserumalbumin-Cpeptidefusionprotein.Intheexperimentalprocess,first,thesequencesofhumanserumalbuminandCpeptidegeneswereobtainedbyPCRamplification,andthenthetwowerelinkedtoconstructthefusionproteingene.Next,thefusionproteingenewasinsertedintotheexpressionvectorofPichiapastoristoobtainarecombinantplasmid.Finally,therecombinantplasmidwastransformedintoPichiapastoriscellsforexpression.

Throughthisstudy,wehopetoconstructanengineeredyeaststrainofhighlyefficientexpressionofhumanserumalbumin-Cpeptidefusionproteinandprovidestrongsupportforsubsequentresearch.

Keywords: