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- 2024-01-20 发布于湖北
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蛋白荧光染料大比拼
要:随着蛋白质组学的发展,定量蛋白质组和多重分析越来越流行,考马斯蓝染色及银染已经无法满足更高的要求。此时,荧光染料的优势就凸显出来。生物通这就带大家看看市场上主流的蛋白荧光染料,包括总蛋白染料、磷酸化蛋白和糖基化蛋白染料。另外,本文还会介绍一些特殊用途的荧光染料。
几十年来,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及相关的blot已经成为蛋白分析的主流技术。考马斯蓝染色和银染也就成了我们最熟悉的染色方法。不过,随着蛋白质组学的发展,定量蛋白质组和多重分析越来越流行,这些染料已经无法满足更高的要求。此时,荧光染料的优势就凸显出来。生物通这就带大家看看市场上主流的蛋白荧光染料,包括总蛋白染料、磷酸化蛋白和糖基化蛋白染料。另外,本文还会介绍一些特殊用途的荧光染料。
总蛋白染料
与传统的考马斯蓝染色相比,荧光染色可将检测的灵敏度降至1ng以下,与银染相当;而与银染相比,荧光蛋白染料的线性范围比银染宽很多,一般可达3个数量级以上,且对不同种蛋白的染色强度变化小,与蛋白质量成清晰的线性关系,而不依赖于多肽序列及糖基化程度。目前的荧光染色法与后续的质谱分析和Edman测序等技术兼容,因此无论在1D还是2D电泳领域都日渐受到研究人员的青睐。蛋白荧光染料需要一个紫外光透射仪(下紫外)才能观察,当然,有激光扫描仪时效果更佳。
名气最大的总蛋白荧光染料当属Invitrogen
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