VEGF转染NSCs治疗新生脑瘫大鼠的实验研究的开题报告.docxVIP

VEGF转染NSCs治疗新生脑瘫大鼠的实验研究的开题报告

一.研究背景及意义

新生儿脑瘫（neonatalcerebralpalsy，NCP）是临床上常见的疾病，其病因与发病机制至今仍不完全清楚。现有研究表明，缺血缺氧、低血糖、低血钙等原因均可导致新生儿脑瘫的发生。退化性变、脑代谢紊乱、细胞凋亡以及神经细胞的氧化应激等方面的损伤是其发生机制之一。

神经干细胞（neuralstemcells，NSCs）在一定程度上可以恢复受损的神经细胞，重建神经系统的结构，被广泛研究用于神经退行性疾病的治疗。但其应用在新生脑瘫的治疗过程中仍然存在一定局限性，其中主要问题之一是在受损区域的生存问题，导致治疗效果不理想。

血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）可以促进新生血管的生成和维持，从而保障神经细胞的营养供给。研究表明，VEGF对神经干细胞的生存、增殖、分化以及神经修复的作用具有显著的促进作用。本研究将采用VEGF转染NSCs的方式，探讨其在治疗新生脑瘫过程中的保护作用，为相关临床应用提供实验依据。

二.研究内容和方法

1.实验目的：探讨VEGF转染神经干细胞治疗新生脑瘫的可行性和疗效。

2.实验方法：

（1）实验动物：Sprague-Dawley大鼠。

（2）建立新生脑瘫大鼠模型：采用IA/R法（大脑缺血再灌注）建立新生脑瘫大鼠模型，并观察其行为学指标。

（3）VEGF转染神经干细胞制备：采用Lenti-VEGF-GFP病毒载体，利用腺病毒转染技术，将VEGF基因成功转染到神经干细胞中。

（4）实验组：实验组大鼠分为三组，分别注射VEGF转染的NSCs、未转染NSCs和PBS对照组。实验时间为1、2、3周。

（5）行为学评估：T-Maze实验与Morris水迷宫测试。

（6）组织取样及处理：拟取大鼠海马组织，HE染色和免疫荧光染色观察海马区域神经元的形态学变化。

3.数据处理和统计分析：数据采用SPSS22.0统计软件进行分析，差异P值0.05为统计学显著。

三.预期结果与创新点

本研究将探讨VEGF转染神经干细胞用于治疗新生脑瘫的可行性和效果。预期结果为，VEGF转染NSCs治疗新生脑瘫大鼠可显著提高其行为指标，促进受损区的新生血管生成和维持，从而提高神经细胞的营养供给和生存率。该研究创新点在于引入VEGF转染NSCs治疗新生脑瘫的方法，探讨其与未转染NSCs及PBS对照组的比较，从而为新生脑瘫治疗提供新的方法和思路。