碱性磷酸酶的分离提取.pptVIP

Page?*Page?*第1页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三*碱性磷酸酶广泛存在于微生物界和动物界。碱性磷酸酶能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应，产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应，磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸受体上。第2页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三*如何获取碱性磷酸酶碱性磷酸酶（AKP）溶于30%乙醇或33%丙酮。但在60%的乙醇或50%丙酮中则形成沉淀。通过离心可以使AKP和其他蛋白分离，从而得到纯化。反复进行纯化的操作，可以获得较高纯度的AKP。第3页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三*

1.综合运用有机溶剂沉淀、离心、分光等方法，从组织中分离纯化及鉴定特定蛋白质的技能。2.掌握碱性磷酸酶制备的操作技术及鉴定的方法实验目的第4页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三*

实验原理碱性磷酸酶在碱性环境中作用于磷酸苯二钠，使之水解生成酚和磷酸盐。酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化形成红色醌类衍生物，其颜色深浅与AKP活性成正比。第5页，讲稿共19页，2023年5月2日，星期三*碱性磷酸酶的提取称取兔肝2g,剪碎后置于玻璃匀浆器中，加入0.01