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131I标记抗胃泌素释放肽前体单链抗体scFv的实验研究的开题报告
题目:131I标记抗胃泌素释放肽前体单链抗体scFv的实验研究
研究背景:
胃泌素释放肽前体(proGRP)是一种高度特异性的肺癌标记物,也被广泛应用于神经内分泌肿瘤(NET)的诊断和治疗。单链抗体(scFv)可以作为一种很好的靶向分子,可以通过核酸技术对其进行构建。131I是一种广泛用于放射性核素治疗的放射性同位素,其半衰期为8.02天。因此,将131I标记到scFv上,可以作为一种潜在的放射性治疗的方式,用于治疗肺癌、NET等疾病。
研究目的:
本研究旨在构建抗proGRPscFv,并将其标记为131I,探索其在肺癌、NET等方面的应用价值。
研究方法:
1.分离和纯化proGRP蛋白,制备成牛血清白蛋白(BSA)偶联体,用于免疫BALB/c小鼠;
2.通过mRNA提取和反转录PCR技术,从免疫小鼠的脾组织中扩增抗proGRPscFv基因片段;
3.构建pET28a载体,将抗proGRPscFv基因片段插入载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达和纯化;
4.将纯化得到的抗proGRPscFv标记为131I,通过SephadexG25凝胶层析技术进行后续纯化。
研究意义:
本研究将为肺癌、NET等疾病的治疗提供一种新的方案,同时也为抗体标记技术的研究和应用提供了一种新的思路和方法。
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