MIP-3α-SA双功能融合蛋白的制备及其生物学功能的鉴定的开题报告.docxVIP

MIP-3α-SA双功能融合蛋白的制备及其生物学功能的鉴定的开题报告

一、研究背景和意义

炎症是机体对抗感染、损伤和异物等外界刺激的一种保护性反应，但过度炎症反应会引起多种炎症性疾病。MIP-3α是一种趋化因子，能够介导多种细胞的趋化和炎症反应，因此成为治疗炎症性疾病的重要靶点。但单一的MIP-3α蛋白存在使用风险，因此需要开发更安全、有效的治疗手段。抗体与蛋白质融合技术是现代生物技术中的重要技术之一，可以将两种不同的蛋白质融合在一起形成双功能蛋白，具有更好的疗效和安全性。因此，本研究拟将MIP-3α与SA（Staphylococcusaureus）蛋白质融合成MIP-3α-SA双功能融合蛋白，以期提高治疗炎症性疾病的效果。

二、研究目的

1.构建MIP-3α-SA双功能融合蛋白的表达载体。

2.在大肠杆菌中表达并纯化MIP-3α-SA双功能融合蛋白。

3.对MIP-3α-SA双功能融合蛋白的生物学功能进行鉴定。

三、研究内容和方法

1.构建MIP-3α-SA双功能融合蛋白的表达载体。通过PCR扩增MIP-3α和SA的基因序列，并使用连接酶连接在表达载体中，构建pET28a-MIP-3α-SA表达载体。

2.表达并纯化MIP-3α-SA双功能融合蛋白。利用pET28a-MIP-3α-SA表达载体在大肠杆菌中表达MIP-3α-SA双功能融合蛋白，并利用亲和层析、离子交换层析等方法进行纯化。

3.对MIP-3α-SA双功能融合蛋白的生物学功能进行鉴定。炎症介质诱导法评价MIP-3α-SA双功能融合蛋白抑制炎症反应的能力；细胞趋化试验评价MIP-3α-SA双功能融合蛋白对细胞趋化作用的影响。

四、预期结果

1.构建出MIP-3α-SA双功能融合蛋白的表达载体。

2.在大肠杆菌中表达并纯化MIP-3α-SA双功能融合蛋白。

3.MIP-3α-SA双功能融合蛋白可以抑制炎症反应，并影响细胞趋化。

五、研究意义和创新性

1.本研究利用抗体与蛋白质融合技术成功地将MIP-3α与SA蛋白质融合，在提高治疗效果的同时，也增加了治疗的安全性。

2.本研究为开发新型治疗炎症性疾病的药物提供了一种新思路。

3.本研究对于认识MIP-3α-SA双功能融合蛋白的生物学功能，以及为研发其他蛋白质融合药物提供了参考。