原创力文档- 1、本文档共2页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
多角体融合的家蚕表皮膜蛋白N141的高效表达与纯化的开题报告
题目：
多角体融合的家蚕表皮膜蛋白N141的高效表达与纯化
摘要：
家蚕表皮膜蛋白N141是一种重要的天然高分子，具有优秀的生物降解性和生物相容性，被广泛应用于生物医学领域。本研究旨在通过多角体融合系统高效表达及纯化家蚕表皮膜蛋白N141。首先，采用PCR法从家蚕基因组DNA中扩增出表皮膜蛋白N141的全长cDNA，并克隆到多角体融合载体中。通过重组质粒的转染和哺乳动物细胞的稳定转染获得表达蛋白，并对不同的表达条件进行优化。对表达蛋白进行纯化，通过SDS和Westernblot鉴定表达蛋白的纯度和分子量。最终获得高表达水平的纯化表皮膜蛋白N141。
研究内容：
1.通过PCR法从家蚕基因组DNA中扩增N141的全长cDNA。
2.克隆表皮膜蛋白N141到多角体融合载体中。
3.重组质粒的转染和哺乳动物细胞的稳定转染。
4.对表达条件进行优化。
5.对表达蛋白进行纯化。
6.通过SDS和Westernblot鉴定表达蛋白的纯度和分子量。
研究意义：
家蚕表皮膜蛋白N141是一种天然高分子，具有优秀的生物降解性和生物相容性。通过高效表达和纯化家蚕表皮膜蛋白N141，可以大幅降低其生产成本，同时也为其在生物医学领域的应用提供了强有力的支持。
研究方法：
1.采用PCR法从家蚕基因组DNA中扩增出表皮膜蛋白N141的全长cDNA，并克隆到多角体融合载体中。
2.将重组质粒转染至HEK293T细胞中，收集培养上清液，检测表达蛋白的表达水平。
3.将重组质粒稳定转染至CHO细胞中，进行稳定表达。
4.对表达条件进行优化，包括细胞密度、转染浓度、表达时间、培养温度等。
5.利用亲和层析柱对表达蛋白进行纯化。
6.通过SDS和Westernblot检测表达蛋白的纯度和分子量。
预期结果：
通过本研究，预计可以高效表达并纯化出家蚕表皮膜蛋白N141，获得高表达水平的纯蛋白，且纯度高、生物活性好。
文档评论（0）