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第四讲多糖的分离纯化方法
汇报人：AA
2024-01-25
引言
多糖的提取方法
多糖的分离方法
多糖的纯化方法
多糖的结构鉴定与活性评价
实验设计与操作注意事项
contents
目
录
01
引言
定义
多糖是一类由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物，广泛存在于动植物和微生物中。
分类
根据来源和结构不同，多糖可分为植物多糖、动物多糖和微生物多糖等。
多糖具有多种生物活性，如免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等。
多糖在生物体内发挥着重要的生理功能，如作为生物体的结构成分、能量储存物质、信号传递物质等。
功能
生物活性
02
多糖的提取方法
利用多糖在酸碱溶液中的溶解度进行提取。
原理
优点
缺点
注意事项
提取效率较高，可缩短提取时间。
酸碱浓度过高可能破坏多糖结构，影响多糖活性。
需严格控制酸碱浓度和提取时间，避免多糖结构的破坏。
原理
提取效率高，可选择性降解多糖，得到特定结构的多糖片段。
优点
缺点
注意事项
01
02
04
03
需根据多糖类型和结构选择合适的酶种类和浓度。
利用特定酶对多糖进行降解，提高多糖的溶解度。
酶的种类和浓度选择对结果影响较大，成本较高。
原理
利用超声波的空化作用、机械效应和热效应等，加速多糖的溶解和扩散。
优点
提取效率高，提取时间短，适用于大规模生产。
缺点
设备成本较高，操作参数对结果影响较大。
注意事项
需优化超声波功率、频率、提取时间等参数，以提高多糖得率和品质。
03
多糖的分离方法
利用多糖在乙醇中的溶解度差异，通过加入乙醇使多糖从溶液中沉淀出来。
乙醇沉淀法
季铵盐可以与多糖形成不溶性复合物，从而通过离心或过滤实现多糖的分离。
季铵盐沉淀法
通过调节溶液pH值，使多糖在特定pH条件下发生沉淀。
酸碱沉淀法
03
亲和色谱法
利用多糖与某些特定配体之间的亲和力进行分离。
01
凝胶色谱法
利用凝胶作为固定相，根据多糖分子大小和形状的差异进行分离。
02
离子交换色谱法
通过离子交换树脂作为固定相，根据多糖所带电荷的不同进行分离。
在毛细管中施加高压电场，使多糖根据电荷和分子大小的差异进行迁移分离。
毛细管电泳法
在凝胶中施加电场，使多糖在凝胶中迁移并根据分子大小和电荷进行分离。
凝胶电泳法
超滤膜分离法
利用超滤膜对多糖溶液进行过滤，根据多糖分子大小的不同实现分离。
纳滤膜分离法
采用纳滤膜对多糖溶液进行过滤，根据多糖分子大小和电荷的差异进行分离。
反渗透膜分离法
利用反渗透膜对多糖溶液进行浓缩和分离，根据多糖与溶剂之间的渗透压差实现分离。
03
02
01
04
多糖的纯化方法
1
2
3
利用凝胶的分子筛效应，按照分子大小对多糖进行分离纯化。
凝胶柱层析法
通过离子交换树脂的吸附和交换作用，对多糖进行分离纯化。
离子交换柱层析法
利用特定的配体与多糖之间的亲和力，实现多糖的分离纯化。
亲和层析法
超滤膜的选择
根据多糖的分子量和截留分子量选择合适的超滤膜。
05
多糖的结构鉴定与活性评价
通过部分酸水解、完全酸水解、高碘酸氧化和Smith降解等化学反应，确定多糖的单糖组成、糖苷键类型以及分支结构等。
化学方法
利用红外光谱（IR）、核磁共振（NMR）等技术，解析多糖的官能团、异头碳构型以及糖链连接顺序等结构信息。
物理方法
采用酶解法研究多糖的结构，通过特异性酶的作用，分析多糖的酶解产物，进而推断其结构特征。
生物方法
体外实验
通过体外细胞培养、细胞毒性实验等方法，评价多糖对细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程的影响。
体内实验
利用动物模型，观察多糖对机体免疫功能、抗氧化、降血糖、降血脂等方面的调节作用。
临床试验
在人体上进行多糖的疗效和安全性评价，为多糖类药物的研发提供科学依据。
多糖的结构特征如单糖组成、糖苷键类型、分支度等与其生物活性密切相关。例如，具有β-1,3-葡聚糖主链和β-1,6-分支链的多糖通常具有较高的免疫活性。
结构对活性的影响
多糖的生物活性可以反映其结构特点。例如，具有抗肿瘤活性的多糖通常具有特定的结构特征，如三股螺旋结构或特定的分支模式等。
活性对结构的反馈
通过对多糖结构与活性关系的深入研究，可以指导多糖类药物的设计与优化，提高药物的疗效和降低副作用。
构效关系研究
06
实验设计与操作注意事项
明确实验目的
确定多糖的来源、种类和预期纯度，以及实验所需达到的目标。
设计实验流程
根据多糖的性质和实验目的，设计合理的实验流程，包括多糖的提取、分离、纯化和检测等步骤。
选择合适的分离纯化方法
根据多糖的性质和实验需求，选择适当的分离纯化方法，如沉淀法、色谱法、电泳法等。
实验室安全
遵守实验室安全规范，注意防火、防爆、防毒等方面的安全事项。
仪器使用
正确使用和维护实验仪器，确保仪器的正常运行和实验的顺利进行。
试剂使用
注意试
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