《水中微生物含量的测定 三磷酸腺苷（ATP）生物发光法》.pdfVIP

团体标准

T/SAWP0012024

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水中微生物三磷酸腺苷（ATP）的测定

生物发光法

Determinationofadenosinetriphosphate(ATP)ofmicroorganismsin

water—bioluminescencemethod

（征求意见稿）

2024-0X-XX发布2024-0X-XX实施

上海市净水技术学会发布

水中微生物三磷酸腺苷（ATP）的测定生物发光法

1适用范围

本标准中的“微生物”是指具有细胞结构的微生物，如细菌、真菌、藻类和原生动物等。

本标准规定了测定水中微生物三磷酸腺苷（ATP）的生物发光法。

本标准适用于以水为基质的样品，包括地表水、水源水、工艺过程水、生活饮用水、直

饮水和瓶装水等。

当制备试样的样品体积为50mL时，方法检出限为0.17pg/mL，测定下限为0.68pg/mL。

本标准不适用于溶解性总固体＞10000mg/L的水样，也不适用于含高浓度有机物、重

金属等干扰物质的水样。

2规范性引用文件

本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用

于本标准。凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

GB/T5750.2—2023生活饮用水标准检验方法第2部分：水样的采集与保存

HJ1000—2018水质细菌总数的测定平皿计数法

ASTMD4012—23aStandardTestMethodforAdenosineTriphosphate(ATP)Contentof

MicroorganismsinWater（美国材料与试验协会ASTMD4012—23a水中微生物的三磷酸

腺苷（ATP）含量标准测定法）

3术语和定义

以下术语和定义适用于本标准。

3.1三磷酸腺苷adenosinetriphosphate(ATP)

由腺嘌呤、核糖和磷酸基团连接而成，是生物细胞内主要的能量来源，又称腺嘌呤核苷

三磷酸、腺苷三磷酸。

3.2荧光素luciferin

生物体内的发光生物色素。

3.3荧光素酶Luciferase

能够产生生物发光的酶的统称。

3.4裂解lysis

溶解和破坏细胞结构，并导致胞内物质释放的过程。

3.5相对光单位relativelightunit(RLU)

描述发光强度或亮度的相对值。

RLUSI

注：非单位。

3.6光度计luminometer

1

测量光物质所发出光信号的仪器。

4方法原理

ATP是高等植物细胞、高等动物细胞和微生物细胞的主要组成部分，通过测定活性细胞

内的ATP浓度，可以快速反映水中活性微生物的含量。测定过程中，ATP和荧光素、荧光

素酶等快速反应产生光，经由ATP标准物质校准的光度计测定RLU，根据公式计算最终得

到ATP浓度。

5试剂和材料

除非另有说明，使用的分析纯试剂或生物试剂应符合相关标准的要求，实验用水为蒸馏

水、超纯水或去离子水。

5.1裂解液：用量为1mL，用于破坏细胞结构后释放ATP。

5.2提取液：使用1mL裂解液（5.1）提取ATP后的混合液。

5.3稀释液：用量为9mL，用于稀释和定容提取液（5.2）。

5.4ATP保存液：1mL提取液（5.2）和9mL稀释液（5.3）的混合物。

5.5荧光素-荧光素酶干粉：含有荧光素和荧光素酶的粉剂。

5.6缓冲液：用于溶解和稀释荧光素-荧光素酶干粉（5.5）的试剂。

5.7荧光素-荧光素酶试剂：将荧光素-荧光素酶干粉（5.5）溶解于缓冲液（5.6）后配制成

的试剂。