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白细胞计数标准操作程序
1方法
目视显微镜计数法。
2原理
血液经白细胞稀释液稀释后,成熟红细胞全部被溶解,充入计数池后,在显微镜下计数一定体
积内白细胞数,换算出每升血液中白细胞数量。
3试剂
3.1白细胞稀释液(自配):
3.1.1成份:
冰醋酸2ml
蒸馏水98ml
10g/L亚甲蓝溶液3滴
3.2试剂制备:将2ml冰醋酸和98ml蒸馏水混合,滴加3滴10g/L的亚甲蓝溶液,混匀过滤后备用。
3.3储存条件:室温保存。
3.4使用期限:1年。
4实验器材
显微镜、滴管、改良牛鲍氏计数池、移液管、吸耳球、6mm×70mm玻璃试管、乳胶手套、移液
器等。
5标本要求
5.1取混匀静脉血标本20l,充入含血小板稀释液0.38ml的小试管内,混匀。在小试管外用记号
笔标明编号。
5.2采血后室温条件下,立即送检。
5.3标本在室温下最多保留4小时。不能在4小时内检测的标本,放置于冷藏冰箱(2℃-8℃)中保
存,8小时内标本有效,使用前从冰箱中取出回复室温后检测。
6操作步骤
6.1取小试管1支,加入白细胞稀释液0.38ml,在小试管外标上明确标示(姓名、编号、日期)。
6.2用移液器准确吸取末梢血20l,擦去管尖外部余血,插入小试管中稀释液的底部,轻轻将血放
出,最后用手摇动试管混和。
6.3充池(做2份),静置2-3分钟,待白细胞下沉。
9
6.4用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数。(WBC1×10时,计数9个大方格内白细胞数,然
后经一定计算转换。)
9
6.5计数时,在两次重复计数误差≤±10%或±0.5×10/L的前提下,取平均值,否则需重做,并
查找原因。
注:两次重复计数是指将同一标本充入已校准的两块不同的计数池内,分别进行手工计数,两次计
数误差WBC≤10%或PLT≤25%。
7计算
4个大方格内白细胞总数
6
白细胞数/L=102010/L
4
6
=4个大方格内白细胞总数5010/L
式中:
4:为每个大方格(即0.1l)内白细胞平均数;
10:1个大方格容积为0.1l,换算成1l;
20:血液稀释倍数;
6
10:由1l换算成1L。
例:低倍镜下计数4角4个大方格内的白细胞数分别为:40,43,37,40,
40+43+37+40
69
则白细胞数/L=102010/L=8.010/L
4
8参考范围
9
成人(4-10)×10/L
9临床意义
9.1增加:
9.1.1生理性:初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼
痛等。
9.1.2病理性:大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传
染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。
9.2减少:病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X线及镭
照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。
10注意事项
10.1大小方格内压线的细胞应按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。
10.2稀释液要过滤,小试管、计数板均须清洁,以免杂质、微粒等被误认为细胞。
10.3每周做一次稀释液空白计数,若发现混有杂质、微粒,在排除计数板、滴管污染的情况下,过
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