岛津RF-6000分子荧光光谱仪培训课件.pdf

岛津RF-6000分子荧光光谱仪培训

岛津企业管理（中国）有限公司分析中心

主要内容概括

一、发光现象

二、荧光基础理论

三、荧光光谱仪结构和荧光光谱特性

四、荧光分析方法建立

五、荧光强度影响因素

六、LabSolutionsRF工作站新功能

七、仪器硬件特点

2

一、发光现象

3

发光

处于基态的分子吸收能量（电、热、

化学和光能）被激发至激发态，然后

从不稳定的激发态返回至基态并发射

出光子，此种现象称为发光。

由光照激发所引起的发光称为光致发

光，例如荧光和磷光；除此之外还有

化学发光、生物发光等。

4

光致发光

荧光：由光照激发所引起的发光现象，一旦停止入射光，发光现

象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。例

如，日光灯的荧光粉等。

日光灯：灯管内部被抽成真

空再注入少量的水银。灯管

电极的放电使水银发出紫外

波段的光。这些紫外光是不

可见的，并且对人体有害。

所以灯管内壁覆盖了一层荧

光粉，它可以吸收那些紫外

光并发出可见光。

5

磷光：由光照激发所引起的发光现象，当入射光停止后，发光

现象持续存在，这种性质的出射光被称为磷光。例如，夜明珠

等。

6

其他发光类型

化学发光：是化学反应中能量以光

能形式释放的过程。

生物发光：是生物体内的化学反应

将化学能转化为光能而发光的现象。

萤火虫发光就是一种生物发光。萤火

虫会产生荧光素和荧光素酶，导致发

光。

7

二、荧光基础理论

8

2.1荧光产生的原理

能量

M※激发态E1

e吸光

收

激发

M基态E0

E=hυ=hc/λ

9

2.2激发态→基态的能量传递途径

电子处于激发态是不稳定状态，返回基态时，通过辐射

跃迁(发光)和无辐射跃迁等方式失去能量；

去活化

辐射跃迁无辐射跃迁

荧光延迟荧光磷光振动弛豫内转移系间跨越外转移

激发态停留时间短、返回速度快的途径，发生的几率大，

发光强度相对大；

荧光：第一激发单重态的最低振动能级→基态；

磷光：第一激发三重态的最低振动能级→基态；

10

2.3荧光产生示意图

振动弛豫

内转换内转换

系间跨越

S2

T