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生物分离工程-细胞的破碎
汇报时间:2024-01-24
汇报人:AA
细胞破碎概述
机械法细胞破碎技术
非机械法细胞破碎技术
细胞破碎效果评价
细胞破碎影响因素及优化策略
细胞破碎技术应用实例分析
总结与展望
细胞破碎概述
细胞破碎是指通过物理、化学或生物方法使细胞壁和细胞膜破裂,释放出细胞内含物的过程。
获取细胞内的特定成分,如蛋白质、酶、核酸等,用于后续的分析、纯化或应用。
目的
定义
机械法
如研磨、高压均质、超声波等,通过机械力使细胞破裂。
物理法
如渗透压冲击、冻融、微波等,利用物理原理改变细胞内外环境,导致细胞破裂。
化学法
如酸碱处理、表面活性剂处理等,通过化学试剂破坏细胞壁和细胞膜结构。
生物法
如酶解法,利用特定酶类降解细胞壁成分,达到破碎细胞的目的。
用于提取和纯化细胞内的生物活性物质,如蛋白质、抗体、疫苗等。
生物制药
用于生产酶制剂、有机酸、生物柴油等化工产品。
化工领域
用于制备调味品、功能性食品配料等,提高产品品质和附加值。
食品加工
用于处理含油废水、有机废水等,实现资源回收和环境保护。
环境治理
机械法细胞破碎技术
01
研磨介质
常采用玻璃珠、石英砂、氧化铝等硬质材料,利用其与细胞间的摩擦和撞击力破碎细胞。
02
研磨设备
包括球磨机、砂磨机、胶体磨等,适用于不同规模和要求的细胞破碎任务。
03
影响因素
研磨介质的粒径、硬度、填充率、搅拌速度以及料液的性质等都会影响破碎效果。
01
02
03
常用搅拌器有桨式、推进式、涡轮式等,通过高速旋转产生的剪切力破碎细胞。
搅拌器类型
搅拌速度越高,产生的剪切力越大,细胞破碎效果越好。
搅拌速度
料液的粘度、浓度、温度等会影响搅拌破碎的效果。
料液性质
利用超声波在液体中传播时产生的空化效应和机械效应破碎细胞。
超声波原理
超声波设备
影响因素
包括超声波发生器、换能器、变幅杆等,可将电能转换为机械能并传递给细胞。
超声波的频率、功率、作用时间以及料液的性质等都会影响破碎效果。
03
02
01
利用高压使料液通过狭窄的缝隙,产生高速流动和剪切力,从而破碎细胞。
高压均质原理
包括高压泵、均质阀、冷却系统等,可实现连续化生产。
高压均质设备
高压均质的压力、温度、流量以及料液的性质等都会影响破碎效果。
影响因素
非机械法细胞破碎技术
高渗溶液法
利用高浓度溶液使细胞内的水分渗出,细胞收缩破裂。
低渗溶液法
利用低浓度溶液使细胞吸水膨胀,最终破裂。
针对细胞壁的成分选择合适的酶,如纤维素酶、果胶酶等。
酶的选择
控制酶解的温度、pH值和时间等条件,以获得最佳的细胞破碎效果。
酶解条件
有机溶剂法
利用有机溶剂(如甲醇、乙醇等)改变细胞膜的通透性,使细胞内容物渗出。
表面活性剂法
使用表面活性剂(如SDS、Tween等)破坏细胞膜结构,达到细胞破碎的目的。
细胞破碎效果评价
破碎率
表示细胞被破碎的程度,通常通过比较破碎前后细胞数量的变化来计算。破碎率越高,说明细胞破碎越彻底。
得率
表示从破碎细胞中释放出的目标成分占细胞总成分的比例。得率越高,说明目标成分释放越充分。
描述破碎后细胞碎片的大小分布情况。通过粒度分布分析,可以了解细胞破碎的均匀程度以及是否存在过大或过小的碎片。
粒度分布
常用的粒度分布分析方法包括激光粒度分析、电子显微镜观察等。这些方法能够准确地测量细胞碎片的大小,并给出详细的粒度分布曲线。
分析方法
VS
通过测定破碎液中目标成分的浓度,可以了解目标成分从细胞中的释放情况。释放量越高,说明细胞破碎效果越好。
成分活性测定
对于某些具有生物活性的成分,还需要测定其活性是否受到影响。通过比较破碎前后成分的活性变化,可以评价细胞破碎过程对成分活性的影响程度。
目标成分释放量
细胞破碎影响因素及优化策略
针对不同类型的细胞和分离目标,选择合适的破碎方法,如机械破碎、化学破碎、酶解破碎等。
破碎方法选择
对选定的破碎方法进行操作参数优化,如破碎时间、破碎强度、温度、pH值等,以提高破碎效率。
操作参数优化
使用合适的添加剂可以改变细胞壁或细胞膜的通透性,从而提高破碎效率。
添加剂使用
刀具优化
优化刀具的形状、材质和排列方式,提高破碎效果和耐用性。
破碎室设计
改进破碎室的结构设计,提高破碎效率,降低能耗和噪音。
控制系统升级
引入先进的控制系统,实现破碎过程的自动化和智能化控制,提高操作便捷性和安全性。
细胞破碎技术应用实例分析
03
疫苗生产
通过细胞破碎技术,从病毒或细菌中提取疫苗成分,制备疫苗。
01
重组蛋白生产
通过细胞破碎技术,从基因工程菌中提取重组蛋白,用于药物研发和生产。
02
抗体生产
利用细胞破碎技术,从杂交瘤细胞或基因工程细胞中获取单克隆抗体或多克隆抗体。
通过细胞破碎技术,处理含有有毒有害物质的废水,降低其对环境的危
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