仪器分析考点.docVIP

1、原子发射光谱法的应用:对金属元素进行定性分析.

2、原子吸收光谱法的应用:该法主要适用样品中微量及痕量元素组分的定量分析

3、吸光度的计算公式的原理是朗伯-比尔定律A=lgI0/I=-lgT其中，A为吸光率；T为透光率；I0为入射光强；I为透过光强

4、原子吸收光谱法仪器

光源光源的作用是发射被测元素的特征共振辐射。

原子化器原子化器的作用是提供能量，使试样干燥，蒸发和原子化。

单色器单色器由入射狭缝、出射狭缝、反射镜和色散元件（光栅）组成，其作用是将被测元素的共振吸收线与邻近谱线分开。

检测器

5、定量分析方法

标准曲线法

这是最常用的基本分析方法。

标准加入法

当无法配制组成匹配的标准样品时，使用标准加入法是合适的。

6、通常说的紫外－可见吸收光谱是指近紫外－可见吸收光谱，即物质分子吸收200～760nm波长范围内的光辐射所产生的吸收光谱。

7、T与A的关系：A＝－lgT

8、朗伯－比尔定律是分子吸收光谱法定量分析的基础

9、紫外-可见光谱中的常见吸收带

R带：含杂原子的不饱和基团的，n→π*跃迁产生，

K带：由共轭双键的π→π*跃迁产生

B带：苯环本身分子振动、转动能级跃迁而产生的吸收带，转动能级消失，谱带较宽。

E带：

10、紫外－可见分光光度计

基本结构:

光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统

↑

样品

11、红外吸收光谱法：

根据物质对红外辐射的选择性吸收特性而建立起来的一种光谱分析方法。

分子吸收红外辐射后发生振动和转动能级的跃迁，故又称为分子振动－转动光谱（简称振转光谱

根据红外光谱的峰位、峰强及峰形，判断化合物中可能存在的官能团，从而推断出未知物的结构

IR是鉴别化合物和确定物质分子结构的最重要的方法之一。

12、紫外－可见吸收光谱与红外吸收光谱的比较

相同点均为分子吸收光谱；都能进行定性、定量分析；都是鉴定化合物和测定分子结构的重要方法。

不同点

产生机制不同：UV-VIS主要是由分子吸收紫外－可见光区的光辐射发生电子能级跃迁而产生的；而IR是分子吸收红外光区的光辐射发生振动能级及转动能级跃迁而产生的。

研究对象和应用范围不同：UV-VIS只适于研究不饱和有机化合物（特别是有共轭体系的有机化合物）以及某些无机物，而不适于研究饱和的有机化合物；而IR几乎适用于所有的有机化合物，其应用范围比UV-VIS广泛的多。

13、官能团区和指纹区及其特点

14、电泳基本原理

电泳是指带电粒子在电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。

电泳技术指利用电泳现象对混合物进行分离分析的技术。

15、影响电泳速度的因素：

样品本身：带电量，分子大小，形状

电场强度：电压

缓冲液：成分，pH，离子强度

支持介质：电渗作用，吸附作用

温度

1）样品本身：带电量、分子大小、形状。Q越多，V越大；r越小，V越大；球形分子纤维状

（2）电场强度：X越大，V越大

（3）缓冲液：pH决定Q，(pH-PI)越大，Q越多，V越大；成分：性质稳定，不易电解。

离子强度：0.02-0.2M。I越大，样品电流减小，V变小；I越小，样品电流越大，V越大，但样品易扩散。

16、（4）支持介质：惰性材料，有一定坚韧度，以保存；吸附力要小；无电渗作用

电渗：液体对固体的相对移动，由缓冲液的水分子和支持介质的表面之间所产生的一种相关电荷所引起。电渗与电泳方向相同，V变大；反之变小。

（5）温度：过高，由于产热增加、水分蒸发，对电泳不利。

17、电泳系统分类

1.连续系统：缓冲液的离子成分、pH、凝胶浓度、电位梯度都相同，带电颗粒电泳时仅具有电荷效应、分子筛效应。

2.不连续系统：缓冲液离子成分、pH、凝胶浓度、电位梯度不连续，带电颗粒电泳时具有浓缩效应、电荷效应、分子筛效应。

18、分子筛效应：分子量或分子大小和形状不同的蛋白质通过一定孔径分离胶时，受阻滞的程度不同而表现出不同的迁移率，这就是分子筛效应。分子量小，阻力小，移动快；分子量大，阻力大，移动慢。电荷效应：电荷量不同，迁移率不同。

19、聚丙烯酰胺凝胶：单体：丙烯酰胺（Acr）；交联剂：甲叉双丙烯酰胺（Bis）；催化剂：过硫酸胺或核黄素；加速剂：四甲基乙二胺（TEMED）；产物：三维网状结构凝胶

20、浓缩效应

1）缓冲液离子成分、pH的不连续性：电极缓冲液的pH=8.3，甘氨酸的电离小，有效迁移率小，称为慢离子；浓缩胶中的Cl-完全电离，有效迁移率大，称为快离子；蛋白质在浓缩胶中介于二者之间。电泳开始后，Cl-跑得最快，留下一段低电导区，产生高电位