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生物分离工程考试提纲汇报人：AA2024-01-25生物分离工程概述分离技术基础生物大分子分离技术细胞破碎与细胞器分离技术层析分离技术及应用电泳分离技术及应用生物分离工程实验设计与数据分析目录01生物分离工程概述生物分离工程定义与特点定义生物分离工程是应用物理、化学和生物学的原理和方法，从生物体系中选择性地分离、纯化和制备目标产物的技术。多样性生物体系复杂，目标产物种类繁多，需要针对不同体系选择合适的分离方法。选择性生物分离工程强调从复杂体系中高选择性地获取目标产物，减少杂质含量。温和性为保持目标产物的生物活性，生物分离过程通常在温和的条件下进行。生物分离工程应用领域生物医药生物化工用于药物的生产、纯化及质量控制，如蛋白质、抗体、疫苗等的分离纯化。应用于酶、发酵产物、生物燃料等的分离纯化及生产过程优化。食品工业环境工程用于食品添加剂、功能性食品成分、天然产物等的提取和纯化。应用于废水处理、重金属去除、有毒有害物质降解等。生物分离工程发展趋势新技术不断涌现如亲和层析、超滤、电泳等新型分离技术不断应用于生物分离工程领域。集成化与自动化将不同分离技术集成于同一系统中，实现自动化操作，提高分离效率。绿色化与可持续性注重环保和可持续性发展，减少废弃物排放和能源消耗。交叉学科融合与生物学、化学、物理学等多学科交叉融合，推动生物分离工程不断创新发展。02分离技术基础沉淀分离法盐析法通过加入中性盐使蛋白质等生物大分子溶解度降低而沉淀析出。等电点沉淀法利用蛋白质等电点时溶解度最低的原理进行沉淀分离。有机溶剂沉淀法通过加入有机溶剂降低溶液的介电常数，使蛋白质等生物大分子溶解度降低而沉淀析出。萃取分离法液-液萃取法反胶束萃取法利用溶质在两种互不相溶的液体中的溶解度差异进行分离。利用表面活性剂在有机溶剂中形成反胶束，将亲水性物质包裹在内部进行分离。超临界流体萃取法利用超临界流体对溶质的溶解能力进行分离，具有高效、环保等优点。吸附分离法吸附剂的选择根据待分离物质的性质选择合适的吸附剂，如活性炭、硅胶、氧化铝等。洗脱与再生吸附条件包括温度、pH值、离子强度等因素对吸附效果的影响。通过改变条件使被吸附物质从吸附剂上洗脱下来，并实现吸附剂的再生。膜分离法膜的类型与选择根据待分离物质的性质和分离要求选择合适的膜类型，如微滤膜、超滤膜、纳滤膜等。膜分离原理包括筛分原理、溶解-扩散原理、电荷排斥原理等。膜分离操作与优化包括膜的清洗、预处理、操作条件的优化等，以提高膜分离效率和使用寿命。03生物大分子分离技术蛋白质分离纯化010203蛋白质沉淀法色谱法电泳法通过改变溶液的pH值、离子强度、温度等条件，使蛋白质从溶液中析出。利用蛋白质在固定相和流动相之间的分配平衡，实现蛋白质的分离纯化。在电场作用下，蛋白质因其带电性质和分子大小的不同而实现分离。核酸分离纯化酚/氯仿抽提法利用酚和氯仿的混合液将核酸从细胞中抽提出来。离子交换色谱法乙醇沉淀法通过乙醇的沉淀作用，将核酸从溶液中析出。利用核酸与离子交换树脂之间的相互作用，实现核酸的分离纯化。多糖分离纯化溶剂沉淀法通过改变多糖溶液的溶剂组成，使多糖从溶液中析出。超滤法利用超滤膜的孔径大小，将多糖从溶液中分离出来。色谱法利用多糖在固定相和流动相之间的分配平衡，实现多糖的分离纯化。04细胞破碎与细胞器分离技术细胞破碎方法机械法如研磨、匀浆、搅拌等，通过物理方式使细胞破裂。非机械法包括渗透压冲击、冻融、超声波、酶解等，通过化学或生物手段破坏细胞膜结构。细胞器分离方法差速离心法01利用不同的离心速度和时间，将不同大小和密度的细胞器分离开来。密度梯度离心法02在离心管中预先加入密度梯度介质，使不同密度的细胞器在离心过程中停留在不同位置。亲和层析法03利用某些细胞器表面特定的配体与层析柱上相应的受体之间的亲和力，实现细胞器的分离。亚细胞组分制备技术核酸的提取与纯化蛋白质的提取与纯化细胞膜的制备通过破碎细胞、去除杂质、沉淀核酸等步骤，获得高纯度的核酸样品。采用适当的破碎方法和缓冲液，将细胞内的蛋白质释放出来，并通过层析、电泳等技术进行纯化。利用差速离心法或密度梯度离心法分离出细胞膜，再通过洗涤、干燥等步骤得到纯净的细胞膜样品。05层析分离技术及应用凝胶层析法凝胶的选择与性质流动相与固定相根据分离需求选择不同孔径和交联度的凝胶。流动相为缓冲液，固定相为凝胶。分离原理应用利用分子筛效应，按分子大小进行分离。蛋白质、多糖、核酸等生物大分子的分离纯化。离子交换层析法离子交换剂的选择与性质流动相与固定相流动相为缓冲液，固定相为离子交换剂。根据目标物的电荷性质选择合适的离子交换剂。分离原理应用利用离子交换剂与目标物之间的电荷相互作用进行分离。氨基酸、蛋白质等带电生物分子的分离纯化。亲和层析法亲和配体的选择与性质流动相与固定相根据目标物的特异性结合位点选