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汇报人：AA2024-01-24生物分离工程孙彦答案上下

生物分离工程概述生物分离技术原理与方法生物大分子分离纯化策略细胞破碎与细胞器分离技术

发酵液预处理及固液分离技术浓缩、干燥与结晶技术

01生物分离工程概述

生物分离工程是生物工程下游技术的重要组成部分，主要研究从生物材料中提取、分离和纯化目标产物的原理、方法和技术。定义生物分离工程涉及的对象复杂多样，包括细胞、细胞器、蛋白质、酶、核酸等生物大分子以及各种小分子物质；分离过程通常需要在温和的条件下进行，以保持生物物质的活性和结构完整性；此外，生物分离工程还强调分离过程的经济性、环保性和可持续性。特点生物分离工程定义与特点

生物物质的分离研究如何利用各种物理、化学原理将目标产物与杂质分离，如沉淀分离、萃取分离、膜分离等。分离过程的优化与控制研究如何优化分离过程的工艺参数，提高分离效率和产物纯度，同时实现对分离过程的自动控制。生物物质的纯化研究如何进一步提高目标产物的纯度，包括色谱法、电泳法、结晶法等纯化技术。生物物质的提取研究如何从生物原料中提取目标产物，包括细胞破碎、溶剂提取、超临界流体提取等方法。生物分离工程研究内容

用于药物的生产和纯化，如抗生素、蛋白质药物、基因工程药物等的分离和纯化。生物医药领域生物化工领域食品工业领域环境保护领域用于生产各种生物化工产品，如酶制剂、有机酸、氨基酸等的分离和纯化。用于食品的加工和保藏，如功能性食品的开发、食品添加剂的提取和纯化等。用于废水处理、废气处理等环保工程，以及从废弃物中回收有用物质等。生物分离工程应用领域

02生物分离技术原理与方法

盐析法通过加入中性盐使蛋白质等生物大分子溶解度降低而沉淀析出。有机溶剂沉淀法利用有机溶剂降低溶液的介电常数，使蛋白质等生物大分子溶解度降低而沉淀析出。等电点沉淀法利用蛋白质等生物大分子在等电点时溶解度最低的原理进行沉淀分离。沉淀法

吸附色谱法利用吸附剂对样品中各组分吸附能力的差异进行分离。分配色谱法利用固定相与流动相之间对待分离组分分配系数的差异进行分离。离子交换色谱法利用离子交换剂与待分离组分之间离子交换能力的差异进行分离。凝胶色谱法利用凝胶的分子筛效应，根据待分离组分的相对分子质量大小进行分离。色谱法

03纳滤法介于超滤和反渗透之间的一种膜分离技术，可以截留部分小分子物质。01超滤法利用超滤膜截留大分子物质，使小分子物质通过膜而达到分离目的。02反渗透法利用半透膜只允许溶剂通过的特性，对溶液施加压力使溶剂通过膜而分离出来。膜分离法

利用待分离组分在电场作用下迁移速度的差异进行分离。电泳法利用待分离组分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的差异进行分离。萃取法利用待分离组分沸点的差异进行分离，适用于液体混合物的分离。蒸馏法通过控制溶液的温度、浓度等条件，使待分离组分以晶体的形式析出而达到分离目的。结晶法其他分离方法

03生物大分子分离纯化策略

沉淀法通过改变溶液的某些性质，如pH值、离子强度、温度等，使蛋白质从溶液中析出。常用的沉淀法有盐析、有机溶剂沉淀、等电点沉淀等。色谱法利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数不同，实现物质的分离。常用的色谱法有凝胶色谱、离子交换色谱、亲和色谱等。电泳法在电场作用下，利用蛋白质分子所带电荷和形状大小的差异，进行分离。常用的电泳法有凝胶电泳、等电聚焦电泳等。蛋白质分离纯化策略

核酸分离纯化策略利用磁珠表面的特异性配体，与核酸分子结合形成复合物，然后通过磁场作用将复合物从溶液中分离出来。该方法具有操作简便、快速高效等优点。磁珠法利用酚和氯仿的混合液将核酸从细胞中抽提出来，然后通过乙醇沉淀等方法进行纯化。酚/氯仿抽提法利用硅胶对核酸的吸附作用，将核酸从混合物中分离出来。该方法适用于从复杂样品中分离纯化核酸。硅胶柱层析法

多糖和脂质体等生物大分子分离纯化策略通过改变溶液的某些性质，如pH值、离子强度等，使多糖或脂质体从溶液中析出。常用的沉淀法有乙醇沉淀、季铵盐沉淀等。色谱法利用多糖或脂质体在固定相和流动相之间的分配系数不同，实现物质的分离。常用的色谱法有凝胶色谱、离子交换色谱等。超滤法利用超滤膜对多糖或脂质体的截留作用，将其从溶液中分离出来。该方法适用于从复杂样品中分离纯化多糖或脂质体。沉淀法

04细胞破碎与细胞器分离技术

如研磨、匀浆、超声波等，通过物理力量使细胞破裂。机械法如使用表面活性剂、酶解法等，通过化学作用破坏细胞膜结构。化学法如冻融法、渗透压法等，通过改变细胞内外环境导致细胞破裂。物理法细胞破碎方法

密度梯度离心法在离心管中预先加入密度梯度介质，使不同密度的细胞器在离心过程中分布在不同的密度层中，从而实现分离。亲和层析法利用某些细胞器表面具有的特异性亲和基团，与层析柱上的配体结合，实现细胞器的分离纯化。差速离心法利用不同的离心速度和时间，将不同大小和密度的