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邻二氮菲分光光度法测定微量铁

一、实验目的

1、学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。

2、掌握TU-1901分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。

实验原理

用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法。该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。Fe2+是浅绿色的、phen是无色的，在紫外分光光度法图谱中，它们都在可见区吸收很弱，两者形成橘红色的配合物，在510nm处有吸收。

在pH=2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+，

反应方程式：Fe2++3phen==[Fe(phen)3]2+

此配合物的lgK稳=21.3,最大吸收波长位于510nm，摩尔吸光系数ε510=1.1×104L·mol-1·cm-1。

3、由于Fe3+也可以与phen形成配合物，可以用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，反应方程式：2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+H2O+4H++2Cl-

测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。

朗伯-比尔定律A=εbc，当b和ε一定时，A与c成正比，成线性关系。

实验仪器与试剂

721型分光光度计，1cm吸收池，10mL吸量管，50mL比色管

1.0*10-3mol/L铁标准溶液，100ug/mL铁标准溶液，0.15%邻二氮菲溶液，10%盐酸羟胺溶液，1.0mol/LNaAc溶液，工业盐酸试样。

实验步骤

吸收曲线的绘制和测量波长的选择

用吸量管吸取2.00mL1.0*10-3mol/L铁标准溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀，再加入2.00mL0.15%邻二氮菲溶液，5.0mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，在光度计上用1cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在440nm到560nm间，每隔10min测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的最适宜波长。

显色条件的选择

显色剂用量

在6支50mL比色管中，各加入2.00mL1.0*10-3mol/L铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀。分别加入1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00mL0.15%邻二氮菲溶液，然后加入5.0mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在光度计上用1cm比色皿，在选定波长下，以试剂空白为参比溶液，测定吸光度。以邻二氮菲体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-试剂用量曲线，从而确定最佳显色剂用量。

溶液pH的选择

取6支50mL比色管中，各加入2.00mL1.0*10-3mol/L铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min。再加入5.0mL0.15%邻二氮菲溶液，摇匀，用吸量管分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL1mol/LNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在光度计上用1cm比色皿，在选定波长下，以各自相应的试剂空白为参比溶液，测定吸光度。绘制A-pH曲线，选择测定铁的适宜pH范围。

工业盐酸中铁含量的测定

标准曲线的制作

在6支比色管中，分别加入0.60、0.80、1.00、1.20、1.40、1.60mL100ug/mL铁标准溶液，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，2.00mL0.15%邻二氮菲溶液和5.0mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在510nm处，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，测定吸光度。

试样测定

准确吸取4mL工业盐酸3份，按标准曲线的操作步骤，测定其吸光度。

实验数据记录与处理

1、吸收曲线的绘制

从图中可以看出[Fe(phen)3]2+的最大吸收波长为510nm，A=0.465。

显色剂用量的选择

Phen的体积/mL

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

吸光度

0.327

0.494

0.471

0.439

0.449

0.515

从图表可以看出当phen的体积为6.00mL时，吸光度最大，因此最佳显色剂用量为6.00mL。

pH值的选择

NaAc的体积/mL

0.50

1.00

1.50

2.00

2.50

3.00

吸光度

0.792

0.869

0.929

0.871

0.878

0.882

从图表可以看出当NaAc的体积为1.50mL时，吸光度最大，因此最佳NaAc的用量为1.50mL。

标准曲线的制作

铁标准溶液ug/mL

0.60

0.80

1.00

1.20

1.40

1.60

吸光度

0.248

0.350

0.420

0.523

0.610

0.71