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【免疫学检验】知识点整理（第二部分）

声明一：本系列知识点由中华检验医学网整理。如非重点，请您

轻骂；真有考到，纯属巧合。

声明二：我们不是学霸，只是资料的搬运工。

8化学发光免疫技术：

1化学发光剂

【酶促反应发光剂：辣根过氧化物酶HRP发光剂（常用底物为鲁

米诺及其衍生物和对-羟基苯乙酸）；碱性磷酸酶ALP发光剂

（AMPPD：有2~30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续

光，在15min达到高峰；4-MUP：在360nm激发光的作用下，发出

448nm荧光）

【直接化学发光剂：改变溶液pH就能发光。口丫口定酯AE在含

过氧化氢的稀碱溶液中能发光。

【电化学发光剂：通过点击表面进行电化学反应而发出光的物质。

化学发光剂三联吡啶[Ru(bpy)3]3+和电子共同三丙胺TPA在阳性

点击表面课同时失去一个电子而发生氧化反应。二级的三联吡啶聊被

氧化成三家，成为强氧化剂，TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基，

课自发失去一个侄子，形成自由基，是一种很强的还原剂，课将一个

高能量电子递给三家的三联吡啶聊，使其形成激发态二价。发射场

620nm的广州，恢复基态。

【电化学发光剂特点：分子小，空间位阻小。衍生物与免疫球蛋

白结合不印象起可溶性与免疫性。水溶性好，稳定性高。

9补体检测及应用:

0基本概念

【补体：存在于人或动物血清中的一组具有酶样活性的不耐热和

功能上连续反应的蛋白质，是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件。

【溶血素：抗绵羊红细胞抗体。实验前56摄氏度30分钟灭活补

体，预先用免疫溶血实验滴定溶血素效价（将不同稀释度的溶血素和

等量的补体与SRBC混合于试管中，37摄氏度30分钟水浴。完全溶

血的试管中液体红色透明，离心后无细胞沉降；完全不溶血的试管中

液体浑浊，离心后红细胞完全沉降，上清液无色透明。一产生完全溶

血的溶血素的最高稀释度作为其效价，确定为1单位。补体结合使用

一般采用2U溶血素）

【经典激活途径：机体体液免疫反应的主要效应机制。抗原抗体

复合物依次激活C1q、C1r、C1s、C4、C2、C3形成C3转哈酶

（C4b2b）与C5转化酶（C4b2b3b）。

【MBL途径：病原微生物表面糖结构与甘露聚糖结合凝集素结合，

进而依次激活MBL相关丝氨酸蛋白酶MASP、C4、C2、C3形成和经

典激活途径相同的C3和C5转化酶。激活过程无须抗体参与。

【旁路激活途径：不经过C1、C4、C2途径，而由C3、B因子、

D因子参与的激活过程。

1补体结合试验CFT原理、技术要点和评价

【原理：（反应系统，指示系统，补体系统）一直抗原与待测抗

体；绵羊红细胞与相应溶血素结合，成为致敏绵羊红细胞；反应系统

与补体系统先发生反应，然后再加入指示系统，根据致敏绵羊红细胞

有无溶血来判断。（有相应抗原或抗体存在，不发生溶血，试验阳性）

【评价：（不需要特殊仪器，对实验室条件要求低。补体活化过

程的放大作用，使灵敏度高0,05ug/ml抗体。可用于定性或半定量检

测，多种类型的抗原或抗体。）（影响因素复杂，操作步骤繁琐且要

求严格，补体不稳定。）

2血清总补体溶血活性（CH50）测定原理和应用

【原理：血清中补体经典活化途径的溶血活性。补体C1-C9被抗

体（溶血素）致敏的绵羊红细胞活化并使后者溶解。当红细胞与溶血

素的量一定时，补体的量及活性与溶血程度正相关，。在50%溶血附

件，S形曲线最都，补体活性稍有变化，溶血程度就有明显变