玉米自交系478叶与根酵母双杂交文库的构建及评价的中期报告.docxVIP

玉米自交系478叶与根酵母双杂交文库的构建及评价的中期报告

本实验旨在构建玉米自交系478叶与根酵母双杂交文库，并对其进行评价。

一、材料与方法

1.材料

★玉米自交系478：本实验所使用的玉米自交系478为前期筛选得到的纯合子，其性状稳定。

★酵母菌株：根据前期的筛选结果选择出的适合于该实验的酵母菌株。

2.方法

★玉米叶、根组织的制备：将玉米自交系478的叶、根组织采集并分别置于冰上冻存。

★DNA提取：采用常规的CTAB法提取玉米叶、根组织DNA；采用酵母菌DNA纯化试剂盒提取酵母DNA。

★DNA片段的制备：将玉米DNA进行酶切，得到500-1000bp长度的DNA片段；将酵母DNA进行随机切割。

★融合：将玉米DNA片段与酵母DNA片段在酵母中进行融合，得到双杂交文库。

3.评价

★质粒提取：采用酵母菌质粒提取试剂盒提取质粒，检测融合效率。

★蓝白斑筛选：将筛选条件设置合适后，进行蓝白斑筛选，筛选出双杂交阳性克隆。

二、预期结果

经过以上实验方法的实施，我们将耗费一定的时间等待实验结果的出现。根据实验的设想，我们预期会得到以下结果：

1.成功构建玉米自交系478叶与根酵母双杂交文库。

2.成功检测到双杂交文库中的融合效率。

3.获得双杂交阳性克隆，丰富玉米的基因资源。

三、结论

本实验旨在构建玉米自交系478叶与根酵母双杂交文库，并对其进行评价。根据预期结果，我们可以得到一个丰富玉米基因资源的工具，为后续研究玉米性状基因提供了一定的帮助，并为玉米的基因治理提供了新的思路。