第五章-4-高等植物基因工程-10.8课件.pptVIP

四、高等植物基因工程高等植物的遗传学特征高等植物基因工程的基本概念高等植物的基因转移系统高等植物的基因表达系统

（一）高等植物的遗传学特征植物的基本特征遗传操作的简易性整株植物的再生性染色体的多倍体性

1、植物的基本特征植物低等植物高等植物含根、茎、叶、花、果分化器官合子经胚再发育为个体苔藓门、蕨类门、裸子门、被子门无根、茎、叶等分化器官合子不经胚直接发育为个体藻类、地衣

2、遗传操作的简易性多数高等植物有自我授精的遗传特征，能产生大量的后代；借助于如风、重力、昆虫传播等自然条件，授精范围广、速度快、效率高，即便是频率极低的基因突变和重组事件，其遗传后果也易被观察。

3、整株植物的再生性将一小片鲜嫩的愈伤组织置于含合适营养和植物生长激素的组织培养基中，细胞会持续生长并分裂。将这些细胞涂在特定固体培养基上，会长出新的幼芽，并重新分化成叶、根、茎，最终成为整株开花植物。愈伤组织：植物损伤后，在伤口长出的软组织。

生长素/分裂素的比例高，则根部发育；比例低，则茎部发育。愈伤组织的细胞分化取决于植物生长素(auxins)和分裂素(cytokinins)的相对浓度。

大多数单子叶农作物（如谷类作物）很难从原生质再生出完整细胞。植物细胞具有纤维素构成的细胞壁，通常不能有效吸收外源DNA。用纤维素酶处理植物细胞壁，形成原生质体，吸收DNA分子后，经过再生、愈伤组织形成，培育出整株植物。

4、染色体的多倍体性多倍体植物在组织培养过程中呈现较高的遗传不稳定性，导致体细胞变异。大约2/3的禾本科植物呈多倍体型，染色体数目24-144。很多高等植物拥有比人类更大的基因组，并以多倍体形式存在。

（二）高等植物基因工程的基本概念高等植物基因工程高等植物细胞基因表达技术高等植物转基因技术转基因植株改良农作物遗传性状植物工程细胞大规模生产蛋白多肽药物

高等植物基因工程的发展历程1983：美国和比利时科学家首次将外源基因导入烟草和胡萝卜；1994：世界上第一种耐储藏番茄在美国批准上市；1995：转基因抗虫、抗除草剂玉米和棉花在美国投入生产；2000：美国转基因大豆的种植面积首次超过普通大豆。

转基因技术虽然只有27年的历史，但所涉及的作物种类甚多。包括：水稻、玉米、马铃薯、小麦、黑麦、红薯、大豆、豌豆、棉花、向日葵、油菜、亚麻、甜菜、甘草、卷心菜、番茄、生菜、胡萝卜、黄瓜、芦笋、苜蓿、草莓、木瓜、猕猴桃、越橘、茄子、梨、苹果、葡萄。

至2009年底，全球已有25个国家批准了24种转基因作物的商业化种植，种植面积由1996年的170万公顷发展至1.34亿公顷，14年间增长79倍。最常见的转基因作物是转基因大豆、棉花、玉米、油菜，其中转基因大豆占全球大豆种植总面积的72%，转基因棉花占全球棉花种植总面积的47%。

（三）高等植物的基因转移系统根癌农杆菌介导的Ti质粒转化法植物病毒介导的转染植物细胞的直接转化植物原生质体的再生植物基因工程中的选择标记和报告基因

根癌农杆菌(A.tumefaciens)是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，能在自然条件下特异性感染几乎所有双子叶植物（尤其豆科类植物）的根部和受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤。1、根癌农杆菌介导的Ti质粒转化法

根癌农杆菌的这种致瘤特性是由其内的野生型Ti(Tumor-inducing)质粒介导的。根癌农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，将T-DNA插入植物基因组中，随其复制而复制。

编码合成冠瘿碱(opine)的酶系。Ti质粒的结构：tmstmrtmtopine代谢区Vir区TiplasmidoriT-DNAleftborderrightborder编码合成植物生长素(auxin)的酶系；编码合成细胞分裂素(cytokinin)的酶系；T-DNA：12-24kbtms：tmr：tmt：160-240kb

植物生长素、细胞分裂素：促使植物创伤组织无限制生长与分裂，形成冠瘿瘤。冠瘿碱：代谢物为氨基酸和糖类，是根癌农杆菌生长必需的物质。

：合成植物生长素、细胞分裂素；Ti质粒的功能区：致瘤区冠瘿碱合成区冠瘿碱代谢区毒性区(Vir区)：参与冠瘿碱合成；：参与冠瘿碱分解；：参与T-DNA转移、插入植物染色体。tms