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红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用及机理研究的任务书
任务书
一、任务目的：
本研究旨在探究红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用及机理，为寻找治疗白血病的新靶点提供科学依据。
二、研究内容：
1.红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用研究
（1）组织细胞培养技术：采用组织细胞培养技术培养K562细胞；
（2）MTT法测定细胞活力：测定不同浓度红芪总黄酮作用后K562细胞的细胞活力；
（3）流式细胞术检测凋亡率：采用AnnexinV-PE/PI双染法检测K562细胞的凋亡率；
（4）沙门氏菌透析酶（LDH）法检测细胞毒性：测量不同浓度红芪总黄酮作用后K562细胞的LDH释放率。
2.红芪总黄酮对K562细胞增殖的机理研究
（1）Westernblot检测细胞周期相关蛋白：检测不同浓度红芪总黄酮作用后细胞周期相关蛋白的表达情况；
（2）实时荧光定量PCR检测细胞周期相关基因表达：检测不同浓度红芪总黄酮作用后细胞周期相关基因的表达水平；
（3）免疫荧光法检测细胞凋亡相关蛋白：检测不同浓度红芪总黄酮作用后细胞凋亡相关蛋白的表达情况；
（4）GSTpulldown法检测细胞信号通路的变化：检测不同浓度红芪总黄酮作用后细胞内相关信号通路的变化情况。
三、任务进度：
第1-2个月：细胞培养和红芪总黄酮作用条件的优化。
第3-4个月：MTT法、流式细胞术和LDH法检测红芪总黄酮对K562细胞增殖的抑制作用。
第5-7个月：Westernblot检测细胞周期相关蛋白的表达情况，实时荧光定量PCR检测细胞周期相关基因表达和免疫荧光法检测细胞凋亡相关蛋白的表达情况。
第8-10个月：GSTpulldown法检测细胞信号通路的变化，并进行数据分析。
第11-12个月：论文撰写和总结。
四、研究经费：
本研究的经费预算为30万元，其中包括实验用品费、仪器设备费、科研人员工资等。
五、研究成果：
本研究成果将以发表科研论文和报告的方式发布，并向有关人员进行汇报，同时为相关领域提供有益的科学参考。
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