反液相色谱法测定有机化合物中甲苯的含量.docVIP

40507035接庆男

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反液相色谱法测定有机化合物中甲苯的含量

一、实验目的：

1.了解高效液相色谱仪的基本结构及基本操作

2.了解反相色谱法的基本规律

3.掌握利用内标法进行色谱定量分析的实验方法

二、实验原理：

高效液相色谱仪的基本组成

HPLC的基本组成示意图

六通阀示意图

在液相柱色谱中，采用颗粒十分细的高效固定相，并采用高压泵输送流动相，全部工作通过仪器来完成。这种色谱法称为高效液相色谱法。主要分为四类，即液固吸附色谱、液液分配色谱、离子交换色谱和分子排阻色谱。

其中液液分配色谱是根据不同组分在两种互不相溶的液相中的分配系数不同而实现分离的，流动相的极性小于固定相的化学键合相色谱称为正相色谱，流动相的极性大于固定相的化学键合相色谱称为反相色谱。

反相色谱是目前最常用的液相色谱分离方法。如以C18烷基键合相柱，采用甲醇或乙氰的水溶液为流动相进行色谱分析。

高效液相色谱法的特点

1.分析速度快

2.分离效率高

3.灵敏度高、易于实现操作自动化

本实验采用内标法，计算混合物中甲苯的含量：

内标法是在试样各含量不同的一系列标准试样中，分别加入固定量的纯物质，即内标物。当测得分析物和内标物对应的响应后，以分析物和内标物的响应比对分析物浓度（或含量）作图，即可得到相应的校正曲线，最后用测得的试样与内标物的响应比（或其函数）在校正曲线上获得