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盐城师范学院探究性实验报告

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土壤中总氮总磷的测定

王玉琪

一、实验研究的目的

1．用过硫酸钾氧化紫外分光光度计发测定土壤中总氮的含量，用钼酸铵分光光度计法对土壤中的总磷进行测定。

2．对现有的土壤中总磷总氮的含量测定方法进行对比论述，主要有甲醛法测定土壤中总氮、行业标准法测定土壤中总磷以及土壤中总氮总磷的联合测定三种方法。

3．对盐城市区、建湖以及阜宁这三个地区土壤中总氮总磷的含量情况进行相应的分析。

4．通过对实验以能够熟练操作仪器。

二、实验研究的背景

氮和磷是植物生长发育所必需的营养元素，其丰缺程度直接影响植物长势和收获产量及品质。土壤是植物生长的基质，为植物生长提供各种营养物质和水分。长期以来，农民为了提高作物产量，盲目、大量的施用各种有机、无机肥料，不仅加剧了环境污染，也带来巨大的经济损失[1]。

土壤总磷量即磷的总贮量，包括有机磷和无机磷两大类。土壤中的磷素大部分是以迟效性状态存在，因此总磷含量并不能作为土壤磷的主要指标，总磷含量高是并不意味着磷素供应充足，而总磷含量底于某一水平时，却意味着磷素供应不足。因此了解土壤总磷贮量，对生产实践有一定的参考价值。土壤含氮量受植被、温度、耕作、施肥等影响，一般耕地表层含磷量为0.00%～0.30%。

根据文献水中总氮、总磷的测定常用方法为过硫酸钾氧化后紫外分光光度计测量。过硫酸钾具有较强的氧化性，使溶液中各种形态的氮转化为硝酸盐类氮，在紫外光区220nm及275nm处测定试液的吸光度，进而求算出总氮含量。环境样品(如水、土壤)中磷的测定方法则一般采用钼酸铵分光光度法，在酸性条件下，使正磷酸盐生成磷钼蓝，在700nm处测定吸光度进而测定磷含量。与总氮的测定类似，必须将样品中含磷化合物转化为正磷酸盐，同样可以通过加氧化剂来实现[2]。

土壤总氮是指土壤中所有化学形态氮的总和，以氮元素占土壤干重的百分率来表示，一般在0.02%～0.3%之间。全氮量是土壤氮素养分的贮备指标，在一定程度上反映土壤氮的供应能力。作物所吸收的氮素50%～70%来自土壤[3]。

土壤中的氮素主要来自施肥、生物固氮、雨水和灌溉水，后二者对土壤氮贡献很小，施肥是耕作土壤氮素的主要来源，而自然土壤的氮素主要来自生物固氮。土壤含氮量受植被、温度、耕作、施肥等影响，一般耕地表层含氮量为0.05%～0.30%，少数肥沃的耕地、草原、林地的表层土壤含氮量在0.50%～0.60%以上。土壤是植物生长的基地，是动物、人类赖以生存的物质基础，因此，土壤质量的优劣直接影响人类的生产、生活和发展[4]。

土壤中总氮量的测定方法有过硫酸钾氧化紫外法应[5]、应用比色法[6]、开氏消煮法[7]、流动分析仪法[8]、重铬酸钾-硫酸消法[9]以及甲醛法[10]等，但操作麻烦，需要一定的仪器或装置。而本文所采用的是甲醛法，甲醛法只需对土壤消化，用甲醛强化后即可用强碱进行滴定，原理严谨，操作简便。

本文用联合测定法测定土壤中总氮总磷含量，甲醛法测定土壤中总氮含量以及行业标准法测定土壤中总磷含量。本实验采集了盐城市区周边的土壤样品，以及建湖、阜宁周边的土壤样品，经过测定土壤中总氮总磷的含量来进行对比。

三、实验原理

1、甲醛法测定土壤中总氮

（1）原理

在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO2，从而破坏有机质结构。用浓硫酸消煮土壤，使其中所含的氮转化为氨，氨与硫酸化合成(NH4)2SO4留在溶液中。如:样品中的含氮有机化合物蛋白质，在浓硫酸作用下水解为氨基酸，氨基酸在硫酸的脱氨作用下还原为氨，氨与硫酸结合成硫酸铵留在溶液中。主要反应为:

NH2CH2COOH+3H2SO4→NH3+2CO2+3SO2+4H2

2NH3+H2SO4→(NH4)2SO4

在消化过程中，用硫酸钾和硫酸铜的混合催化剂作加速剂。铵盐中的NH4+酸性太弱不能用NaOH标准溶液直接滴定，可将硫酸铵与甲醛作用，定量生成质子化六次甲基四胺和H+。反应如下:

4NH4++6HCHO→(CH2)6N4H++3H++6H2O

反应生成的(CH2)6N4H+(Ka=7.1×106)和H+可以被NaOH标准溶液准确滴定。这4molNH4+在反应中生成4mol可被滴定的酸，故氨与NaOH的化学计量数比为1:1。试样中的游离酸在加甲醛以前以甲基红为指示剂，用NaOH预中和至黄色(PH=6)，再加入甲醛以酚酞为指示剂，用NaOH标准溶液滴定强化后产物。

2、行业标准法测定总磷

（1）原理

土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和硫酸溶解熔块，在规定条件下样品与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，用分光光度法定量测定[11]。

3、联合测定法测定总氮总磷

（1）原理

土壤样品中总氮的测定常用过硫酸钾氧化—紫外分光光度法