小鹅瘟病毒强毒株细胞适应毒的培育及其VP3基因的表达的任务书.docxVIP

小鹅瘟病毒强毒株细胞适应毒的培育及其VP3基因的表达的任务书

任务名称：小鹅瘟病毒强毒株细胞适应毒的培育及其VP3基因的表达

任务目的：通过培育小鹅瘟病毒强毒株适应细胞毒，并研究其VP3基因的表达，为病毒学研究提供参考和基础。

任务步骤：

1.制备培养基：准备含有10%胎牛血清和1%青霉素链霉素的DMEM培养基。

2.培育细胞：使用小鹅卵巢细胞（SEOCs）作为培育细胞，将其悬浮在DMEM培养基中，放入无菌的培养皿中，在37℃的恒温条件下培养。

3.培育病毒：将小鹅瘟病毒强毒株接种在SEOCs细胞中，使其适应细胞毒。

4.收集病毒：等到病毒在细胞中复制并繁殖，用离心法将病毒分离出来。

5.提取RNA：使用RNA提取试剂将病毒RNA提取出来。

6.反转录：将提取出来的RNA通过反转录技术转录成DNA。

7.克隆VP3基因：将DNA片段克隆到表达载体中，以表达VP3基因。

8.表达VP3基因：将表达载体转染到细胞中，使其表达VP3基因。

9.鉴定VP3基因：通过Westernblotting等技术，鉴定细胞中VP3基因的表达情况。

任务成果：

1.成功复制培育小鹅瘟病毒强毒株适应SEOCs细胞的能力。

2.成功提取出小鹅瘟病毒强毒株的RNA，并通过反转录技术转录成DNA。

3.成功克隆VP3基因到表达载体中，并让细胞表达该基因。

4.成功鉴定出表达载体转染到细胞中VP3基因的表达情况。

任务参考文献：

1.SunH,LiuY,WangC,etal.AdaptationofMuscovyduckparvovirusinchickenembryonicfibroblastsandduckembryofibroblasts[J].Virusresearch,2008,135(2):283-288.

2.YuM,ZhangY,GaoX,etal.CharacterizationofthepromoteractivityofthegooseparvovirusP9-1gene[J].Archivesofvirology,2015,160(7):1819-1828.