微生物的选择培养与计数课件-高二生物人教版选择性必修3.pptxVIP

1.2微生物的培养技术及应用;课题背景;2.筛选原理：;3.选择培养基举例;稀释涂布平板法;;（1）土壤取样;（2）制备培养基;2、该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？;②牛肉膏蛋白胨培养基：;在火焰旁称取土壤10g，加入90ml无菌水中，摇匀，制成稀释10倍的土壤菌液。;6支试管，分别加入9ml无菌水;注：测土壤中细菌数量，一般选用1x104、1x105和1x106倍的稀释液进行平板培养。;灼;①每个浓度至少设置4个平板，1、2、3平板是选择培养基（实验组，三个重复），4为牛肉膏蛋白胨培养基;稀释涂布平板法实验操作;（5）培养与观察;当菌落数目稳定时，选取菌落数在30~300的平板进行计数，同一稀释度下至少计数3个平板，求出平均值，并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。设计如下表格记录并计数。;实例分析1：;在恒温培养箱中培养一段时间后，3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个，则可以推测酸奶中每毫升含菌数为_________个．;两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释

倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。

1.甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。

2.乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。

你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？;①为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________的平板上进行计数。;②为增强实验说服力与准确性，设计实验时，需要涂布至少____平板作为重复组。（重复实验，减少误差）。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。

④因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数表示。

⑤分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。;;可以观察菌落周围是否出现红色环带，红色环带直径与菌落直径比值越大，说明分解能力越强。;①结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。

②你是否获得了某一稀释度下菌落数为30～300的平板?在这一稀释度下，是否至少有2个平板的菌落数接???

③你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落数是多少?与其他同学统计的结果接近吗?如果差异很大，可能是什么原因引起的?;小结：两种接种方法的比较;2.显微镜直接计数;菌种的保存;配制斜面培养基作用是什么？试管为什么要加塞棉塞？;练习与应用;2.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数,原因是（）

A.菌落中的细菌数目是固定的

B.平板上的一个菌落就是一个细菌

C.通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同

D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌;二、拓展应用;2.地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用精杆等生产酒精，用纤维索酶处理服装面料等。已知刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维索被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈(如下图所示)。请回答下列问题。;纤维素与纤维素酶;土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把纤维素分解为葡萄糖，后再利用。;2.纤维素酶

纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。;（1）现在要从土壤中分离纤维素分解菌，请你给出详细的实验方案。;①纤维素分解菌大多分布富含纤维素的环境中，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。

;③讨论:如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？;2、选择培养;将选择培养后的培养基进行等比稀释101～107倍。;在产生明显的透明圈的菌落，挑取并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C－370C培养，可获得纯化培养。;高压蒸汽灭菌;二、拓展应用;二、拓展应用;探究-实践;;结果分析与评价;主要方法;课题小结;1.空气中微生物总数的检测？;1.科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶;