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γ-聚谷氨酸发酵关键技术的研究

γ-聚谷氨酸(γ-PGA)是微生物合成由谷氨酸单体缩合形成的高聚物,单体间以酰胺键相互连接,具有多种优良特性,如无毒、生物可降解、生物相容、强溶于水等,广泛用于食品、环保、农业等领域。本文从γ-PGA生产菌的诱变选育和发酵过程优化展开研究,以期提高γ-PGA产率。主要研究内容如下:(1)采用ARTP技术对出发菌株L13进行诱变处理,诱变条件为:处理距离2mm、最佳处理时间

300s、样品加量10μL、通气量10SLM。

以不产生脂肽和γ-PGA高产作为筛选标准,从突变库中筛选获得一株性能优良的突变株ZF5。通过摇瓶发酵与5L罐分批发酵验证,该菌株发酵过程仅产生少量泡沫,不产生脂肽副产物,在5L罐中发酵18hγ-PGA产率达到26.1g/L。(2)在对枯草芽孢杆菌ZF5发酵特性研究基础上,通过添加适量的金属离子、氨基酸对γ-PGA发酵进行调控,以提高γ-PGA产率。

结果发现:Ca2+、Mo6+能够促进菌体的生长和γ-PGA的生物合成,最适浓度分别为0.1g/L和0.06g/L;Zn2+对菌体生长和产物合成都无显著影响;Cu2+和Mn2+对菌体的生长有一定抑制作用,但是Mn2+对γ-PGA产物积累促进作用最强,添加0.3g/L的Mn2+发酵24hγ