固定化酶催化的动力学特征.pptVIP

外扩散限制效应在上述方法中，是一个重要的无因次准数，其物理意义为当1时，酶催化的最大反应速度要大大慢于底物的传质速率，此时该反应过程由反应动力学控制；当1时，底物的传质速率大大慢于酶催化的最大反应速度，此时该反应过程由传质扩散控制。第31页，课件共59页，创作于2023年2月外扩散限制效应（2）作图法求[S]i值和Vi值根据，底物在固定化酶外表面的浓度应同时满足传质速率方程式和反应速度方程式，因此也可通过作图法求出值和相应的值。第32页，课件共59页，创作于2023年2月外扩散限制效应第33页，课件共59页，创作于2023年2月四、内扩散限制效应对于固定于多孔性载体中的固定化酶，其催化反应的主要部位是在颗粒内部。内扩散阻力主要来自于微孔内的阻力。这种内扩散阻力的大小与固定化酶颗粒内部的物理结构参数、反应物的性质等因素有关。在讨论内扩散对固定化酶催化反应动力学的影响时，常将均匀分布着酶的多孔球形颗粒作为研究的模型。因此要首先研究颗粒载体的结构参数和物质在微孔内的扩散。第34页，课件共59页，创作于2023年2月1．载体的结构参数a．比表面积Sg它指单位质量载体所具有的内表面积，以m2/g表示。通过实验测定，一般载体的比表面积可达200～300m2/g。b．微孔半径多孔载体的内表面积与微孔孔径的大小有关。孔径越小，比表面积越大。若单位质量载体所具有的孔体积以Vg表示，则平均微孔半径为第35页，课件共59页，创作于2023年2月微孔半径的计算设微孔为圆柱状管道，长为l，半径为r，则其内表面积（不算两端）孔体积两式相除，第36页，课件共59页，创作于2023年2月载体的结构参数c．孔隙率载体的孔隙率为载体颗粒内孔隙所占有的体积与该颗粒体积之比。因此值恒小于1，它在数值上与Vg的关系为。式中为表观密度，它表示单位颗粒体积中所含有的固体的质量。第37页，课件共59页，创作于2023年2月载体的结构参数d．颗粒当量直径为了表示不同形状固定化酶颗粒的大小，一般采用如下方法：①以与颗粒体积相等的球体直径dV表示，称为“体积相当直径”；②以与颗粒外表面积相等的球体直径dS表示，称为“外表面积相当直径”；③以与颗粒的比表面积相等的球体直径dSV表示，称为“比表面积相当直径”。第38页，课件共59页，创作于2023年2月体积相当直径对于同一非球形颗粒，按上述不同定义表示的当量直径在数值上是不同的。假设某任一形状的固定化酶颗粒，其体积为VP，外表面积为AP，则根据上述定义的各当量直径分别为：体积相当直径dV第39页，课件共59页，创作于2023年2月外表面积相当直径外表面积相当直径dS第40页，课件共59页，创作于2023年2月比表面积相当直径比表面积相当直径dSV第41页，课件共59页，创作于2023年2月形状系数ψ描述颗粒形状可引入形状系数的概念，用ψ表示。其定义为与颗粒体积相同的球体的外表面积AS与颗粒的外表面积AP之比，即ψ＝。由于体积相同的几何体中球体的外表面积最小，所以一般是ASAP，ψ1。如果颗粒就是球体，则ψ＝1。ψ表示了任意颗粒的外形与球体相接近的程度，故又称为圆球度。正方体颗粒的圆球度为0.806。第42页，课件共59页，创作于2023年2月关于固定化酶催化的动力学特征第1页，课件共59页，创作于2023年2月一、酶的固定化对其动力学特性的影响1．酶活性的变化酶在固定化时，总会有一部分未被固定而残留在溶液中，造成了酶的部分损失；同时由于各种原因也会造成已被固定的酶的活性有所下降。这是大多数固定化酶的情况，只有个别的酶在固定化后活性未变或反而升高。如果固定化酶的动力学仍服从米氏方程，则可通过米氏常数Km值的大小来反映酶在固定化前后活性的变化。第2页，课件共59页，创作于2023年2月一些酶在溶液中和固定化后的米氏常数值酶底物固定化试剂Km（mol/L）肌酸激酶ATP无（溶液酶）对氨苯基纤维素6.5×10－48.0×10－4乳酸脱氢酶NADH无（溶液酶）丙酰玻璃7.8×10－65.5×10－5α－糜蛋白酶N-乙酰酪氨酸乙酯无（溶液酶）可溶性醛葡聚糖1.0×10－31.3×1