SN_T 3585-2013出口活鱼克林霉毒检测技术规范.docxVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T3585—2013

出口活鱼克林霉素检测技术规范

Inspectionprotocolforclindamycinforexportlivefish

2013-08-30发布

2014-03-01实施

中华人民共和国

国家质量监督检验检疫总局

发布

I

SN/T3585—2013

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：卢晓中、汤志旭、王凤美、许辉、李强、郝建光、罗忻。

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SN/T3585—2013

出口活鱼克林霉素检测技术规范

1范围

本标准规定了出口活鱼中克林霉素残留液相色谱、液相色谱串联质谱检测技术规范。

本标准适用于出口活鱼中克林霉素残留的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1甲醇：色谱纯。

3.2乙腈；色谱纯。

3.3正乙烷：色谱纯。

3.4磷酸二氢钾。

3.5磷酸。

3.60.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH=2.5):13.61g磷酸二氢钾溶解于1L水中，用磷酸溶液调节

pH=2.5,使用前配制。

3.7甲醇-水溶液(2+8,体积比):200mL甲醇与800mL水混合后振荡摇匀。

3.8乙腈-水溶液(1+1,体积比):50mL乙腈与50mL水混合后振荡摇匀。

3.9克林霉素标准物质：克林霉素(分子式：C?H?CIN?O?S;CAS号：18323-44-9),纯度≥98%。

3.10克林霉素标准储备溶液：1.0mg/mL。准确称取10.0mg克林霉素标准物质放入10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，-18℃避光保存。

3.11克林霉素标准中间溶液：10.0μg/mL。移取0.1mL标准储备溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，4℃避光保存。

3.12克林霉素标准工作溶液：移取适量标准中间溶液，用样品空白提取液定容至1.0mL,配制25ng/mL～500ng/mL系列基质标准工作溶液，供液相色谱-串联质谱法测定用：配制0.25μg/mL~

5μg/mL系列标准工作溶液，供液相色谱法测定用。用前配制。

3.13OasisHLB固相萃取柱或相当者：500mg,6mL(或相当者),使用前，分别用3mL甲醇、3ml水活化。

3.14滤膜：0.22μm。

4仪器

4.1高效液相色谱仪。

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SN/T3585—2013

4.2高效液相色谱-申联质谱仪：配有电喷雾离子源。

4.3天平：感量0.01g,0.0001g。

4.4捣肉机。

4.5氮气浓缩仪。

4.6具塞聚丙烯离心管：50mL。

4.7离心机。

4.8振荡器。

5抽样与样品制备

5.1检测批和抽样数量

按出口活鱼同一养殖池塘、同一规格活鱼为一检测批。每检验批随即抽取样品时，至少取活鱼两条

以上，且保证总重量大于1.0kg,标明标记并及时送实验室。

5.2样品制备

送实验室待测活鱼，将其窒息后，开膛，去除内脏，取可食部分用捣肉机捣碎成浆状，然后按四分法

分样，均分成2份，装入洁净容器中密封，并标明标记。

5.3试样的保存

将试样于一18℃冷冻保存。在抽样及样品制备的操作过程中，应防止样品受到污染。

6测定步骤

6.1提取

称取5g均匀试样(精确到0.01g)于50mL离心管中，加入15mL乙腈，涡旋混匀1min,振荡10min,在4℃下以8000r/min转速离心5/min,取上清液于另一离心管中，残渣用10mL乙腈洗涤，涡旋30s后以8000r/min离心5min,合并上清液。加人15mL乙腈饱和正己烷，振荡10min,离心

分离后弃去正己烷，合并乙腈层，40℃下氮气吹干，用5mL20%甲醇水溶液溶解。

6.2净化

上述溶解液过OasisHLB柱，依次用3mL水，3mL20%甲醇水溶液淋洗，再用5mL甲醇洗脱，洗脱液于40℃氮气吹干。