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食品微生物

基本技能

利用IMVIC生化试验鉴定大肠杆菌

IMVIC生化试验简介

IMVIC生化试验是用于鉴定大肠杆菌的生化试验，

包括靛基质试验、甲基红（MR）试验、V-P试验和西

蒙氏柠檬酸盐利用试验。

典型大肠杆菌IMVIC生化试验结果为：＋＋－－

或－＋－－

一、任务准备

器材与试剂

待检菌株、酒精灯、接种环（无菌棉棒）、色氨酸生化管、MR-VP用

生化管、西蒙氏柠檬酸盐利用生化管、靛基质试剂、甲基红指示剂

、V-P甲液、V-P乙液等。

二、任务实施

1.靛基质试验

原理：

吲哚试剂

色氨酸吲哚玫瑰吲哚

操作方法：

将待检菌株接种于色氨酸生化管中，

36℃±1℃培养18h~24h，必要时可延

长至48h，取出生化管后，沿管壁滴加

靛基质（吲哚）试剂2~4滴，观察结果。

二、任务实施

1.靛基质试验

试验结果

–试剂层红色：阳性（+）

–试剂层黄色：阴性（-）

二、任务实施

2.甲基红（MR）试验

原理：

–某些细菌可分解葡萄糖产生的大量小分子有机酸，滴加甲基红指示剂

后可使培养基变红色

–甲基红指示剂变色范围是pH4.4~6.2

操作方法：

将待检菌株接种于MR-VP用生化管中，

36℃±1℃培养2d~5d，取出生化管后

，沿管壁滴加甲基红指示剂试剂2~4滴

，观察结果。

二、任务实施

2.甲基红（MR）试验

试验结果

–培养基红色：阳性（+）

–培养基黄色：阴性（-）

二、任务实施

3.V-P试验

原理：

某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸，并进一步将丙酮酸脱羧成为乙

酰甲基甲醇，后者在碱性环境下被空气中的氧氧化成为二乙酰，进

而与培养基中的精氨酸等所含的胍基结合，形成红色的化合物。

操作方法：

将待检菌株接种于MR-VP用生化管中，

36℃±1℃培养2~5d，取出生化管后，

沿管壁滴加V-P甲液、V-P乙液各2~4滴

，观察结果。

二、任务实施

3.V-P试验

试验结果

–培养基红色：阳性（+）

–培养基黄色：阴性（-）

空白对照阳性

二、任务实施

4.西蒙氏柠檬酸盐

利用试验

原理：

若细菌利用柠橼酸盐，则培养基内铵盐分解产生氨从而变为碱性，

指示剂溴麝香草酚兰由草绿色变为深蓝色。若细菌不能利用柠橼

酸盐，培养基内无细菌生长，仍为草绿色。

操作方法：

将待检菌株接种于西蒙氏柠橼酸盐利

用生化管中，36℃±1℃培养18h~24h

，取出生化管后，观察结果。

二、任务实施

4.西蒙氏柠檬酸盐

利用试验

试验结果

–培养基变蓝色：阳性（+）

–培养基为不变（绿色）：阴性（-）

三、实验结果

大肠杆菌IMViC试验结果

大肠杆菌IMVIC生化试验结果为：＋＋－－或－＋－－

三、实验结果