豌豆早期结瘤素基因克隆与凝集素基因psl转化烟草研究的中期报告.docxVIP

豌豆早期结瘤素基因克隆与凝集素基因psl转化烟草研究的中期报告

豌豆早期结瘤素基因（Pisumsativumearlynodule-specificgene，Psenod12A）和凝集素基因（Peasseedlectin，psl）在豌豆根瘤菌和豌豆之间的共生过程中扮演着重要角色。为了研究这两个基因的功能和调控机制，我们从豌豆中克隆了完整的Psenod12A基因和psl基因，并将这两个基因转化到了烟草中进行了初步研究。

首先，我们对Psenod12A和psl基因进行了序列分析和构建。Psenod12A基因长度为869bp，含有一个开放阅读框（ORF），编码287个氨基酸，预测的分子量为31.77kDa，等电点为8.81。psl基因长度为1029bp，含有一个ORF，编码342个氨基酸，预测的分子量为36.49kDa，等电点为6.0。我们将这两个基因构建成pBI121载体，以植物体内表达。

接着，我们将构建好的pBI121-Psenod12A和pBI121-psl转化到了烟草中。通过PCR和Southernblotting等方法，我们初步验证了外源基因的插入和表达情况。我们还进行了Westernblotting分析，检测由Psenod12A和psl基因编码的蛋白质在转基因烟草中的表达情况。结果显示，Psenod12A蛋白在转基因烟草中表达，并能够与Psenod12A基因