高效液相色谱思考题试卷及答案.pdfVIP

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高效液相色谱法的习题和参考答案

思考题与练习题

1.高效液相色谱是如何实现高效、快速、灵敏的.

解：

气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的开展创造条件，从它的高效、高速和高灵

敏度得到启发，采用5-10μm微粒固定相以提高柱效，采用高压泵加快液体流动相的流

速；设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器，提高检测灵敏度，抑制经典液相

色谱的缺点，从而到达高效、快速、灵敏。

2.简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素，如何减少谱带扩，提高柱效.

解：

液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及

柱外效应。

在液相色谱中要减少谱带扩，提高柱效，要减少填料颗粒直径，减小填料孔穴深度，

提高装填的均匀性，采用低黏度溶剂作流动相，流速尽可能低，同时要尽可能采用死体

积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。

3.色谱柱A柱长为15cm，载体粒度为5μm。另一B柱长为30cm，载体粒度为10μm。两

柱的柱效相等吗.

解：

∵l=L/dp

∴lA=15/0.0005=30000

lB=30/0.0010=30000

A柱的折合柱长为30000，B柱的折合柱长也为30000，说明组分在两根柱从柱入口到出

口都经过30000个载体颗粒，两柱的柱效相等。

4.流动相为什么要脱气.常用的脱气方法有拿几种.

解：

流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处

〔1〕气泡进入检测器，引起光吸收或电信号的变化，基线突然跳动，干扰检测；

〔2〕溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时，可能与流动相或固定相发生化学反响；

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〔3〕溶解气体还会引起*些样品的氧化降解，对别离和分析结果带来误差。因此，使

用前必须进展脱气处理

常用的脱气法有以下几种:

〔1〕加热脱气法；

〔2〕抽吸脱气法

〔3〕吹氦脱气法；

〔4〕超声波振荡脱气法

5.在液相色谱中。常用作固定相，又可用作键合相基体的物质是

A.分子筛B.硅胶C.氧化铝D.活性炭

解：

B硅胶

要形成化学键合固定相，所用的基质材料应有*种化学反响活性，在四种固体固定相中

只有硅胶含有硅醇基，是能进展键合的活性官能团

6.在150×Φ2mm硅胶柱流动相为己烷/甲醇〔150:2〕，紫外检测器色谱条件下别离丙烯

酰胺，判断以下组分的出峰次序，为什么.

A.B.

解：

在给定的色谱条件下，组分B先出峰，组分A后出峰。以硅胶为固定相，己烷/甲醇

〔150:2〕为流动相，该体系为正相色谱，样品的极性AB，在正相色谱体系极性小的

组分先出峰，极性大的组分后出峰，所以出峰次序为B先出，A后出

7.在硅胶柱上，用甲苯为流动相，*组分的保存时间为30min，如果改用四氯化碳或乙醚为

流动相，试指出选用哪中溶剂能减少该组分的保存时间.为什么.

解：

该体系为正向色谱体系。在该体系中流动相的极性增大保存值减少。流动相甲苯、四

氯化碳及乙醚的溶剂强度参数分别是0.29、0.18、0.38，因此选用溶剂强度参数大于甲苯

的乙醚，可缩短该化合物的保存时间

8.为什么体积排阻色谱中任何组分的分配系数必须符合0≤K≤1.如果K1说明什么问题

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解：

因为组分的分配系数为K=Cs/Cm,Cs与Cm分别为组分在固定相和流动相中的浓度,

当分子直径大于孔径时,此时Cm=0,∴K=0.当分子直径小于固定相孔径时,组分向空隙流

动相扩散,到达平衡时,一半组分在空隙,一半组分在空隙外,此时K=1.0,假设分子直径介

于以上两种极限情况之间,K一